Infecção por Toxoplasma gondii: caracterização sorológica e molecular em pacientes atendidos pelo SUS

Resumo

A toxoplasmose, uma doença resultante da infecção por Toxoplasma gondii, manifesta-se clinicamente nas formas cerebral, congênita e ocular. A prevalência desta doença varia nas diferentes áreas ao redor do mundo e depende de vários fatores. Estudos epidemiológicos realizados em diferentes estados brasileiros nas últimas décadas revelaram grande variabilidade nos índices de infecção por T. gondii. Nos últimos anos nosso grupo revelou que os índices de infecção por T. gondii em gestantes da região noroeste do Estado de São Paulo são de aproximadamente 65,0%, que o índice de infecção congênita em São José do Rio Preto, SP é de 2,3% e de toxoplasmose ocular é de aproximadamente 27% entre pacientes portadores de doenças oculares. A caracterização gênica do T. gondii realizada em amostras humanas revela uma grande diversidade e tenta-se esclarecer a relação entre as diferentes cepas e a infecção humana, inclusive de nossa região. O objetivo geral deste projeto é investigar e caracterizar a infecção por T. gondii em seus aspectos sorológicos e moleculares na região noroeste do Estado de São Paulo. Seus objetivos específicos compreendem: 1.Validar os testes sorológicos comerciais utilizados na identificação de anticorpos anti-T. gondii em grupos de pacientes com suspeita ou diagnóstico clínico de toxoplasmose ocular, congênita ou gestacional; 2. Avaliar nestes pacientes a aplicabilidade do cPCR, Nested PCR e qPCR em amostras biológicas (sangue periférico e liquido amniótico); 3. Caracterizar genotipicamente as cepas de T. gondii da região com o uso do método de PCR-RFLP e estabelecer relação com o quadro clínico dos pacientes acometidos (Parceria exterior). Serão selecionadas amostras de soro e DNA genômico de pacientes com diagnóstico clínico de toxoplasmose ocular, gestacional e congênita, estocadas no Laboratório de Imunogenética do Departamento de Biologia Molecular da FAMERP, cujos dados epidemiológicos dos respectivos pacientes foram coletados. Os métodos comerciais ELISA (DiaSorin), ELFA (Biomerieux) e MEIA (Abbot) serão utilizados para a identificação de anticorpos IgA, IgM e IgG anti-T. gondii e a identificação do DNA genômico do T. gondii será realizada com o uso dos métodos PCR convencional, PCR nested, PCR Tempo Real e PCR-RFLP. Os resultados das análises sorológicas e moleculares serão comparados. Os testes estatísticos Ç2 (com correção de Yates), o teste exato de Fisher e o test t (quando for o caso) serão utilizados nas comparações. Também será calculado o Odds Ratio e o intervalo de confiança a 95%, quando necessários. A sensibilidade, a especificidade e os valores preditivos positivos (VPP) e negativos (VPN) também serão calculados para cada teste sorológico e molecular empregado nas análises. Os resultados poderão contribuir para se compreender a importância da adoção de medidas de prevenção da infecção por T. gondii, além de identificar o tipo de cepa que afetam os pacientes da região. Também poderão orientar programas de esclarecimento, educação, prevenção, epidemiologia e mesmo tratamento das diversas formas de toxoplasmose na região noroeste do Estado de São Paulo.