Imobilização da enzima nucleosídeo difosfato quinase (NDK) de Leishmania major: do estudo de condições à aplicação na triagem de ligantes

Resumo

A leishmaniose, segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), é uma doença negligenciável, que aflige as populações em países subdesenvolvidos desfigurando, estigmatizando e matando. Diante desse quadro, a OMS através do Special Programme for Research and Training (TDR) adotou como meta a erradicação da doença, que atualmente é tratada com fármacos tóxicos e de alto custo. Pesquisadores têm purificado e caracterizado proteínas de microorganismos patogênicos ao homem, uma estratégia na busca por moléculas que possam atuar como alvos biológicos. A enzima Nucleosídeos Difosfato Kinase b (NDKb) possui papel fundamental na manutenção das razões de NTPs e dNTPs intracelulares, ela é secretada por Leishmania major sendo determinante no processo invasivos/evasivos crucial para o sucesso da infecção dos macrófagos. Considerando que a enzima seja um alvo biológico em potencial, é necessário o desenvolvimento e/ou aprimoramento de técnicas que tornem hábil os estudos com esta biomolécula. A biocromatografia tem sido utilizada com sucesso e a associação de IMERs a sistemas cromatográficos de alta eficiência, como um método multidimensional, é uma estratégia promissora para o screening de inibidores seletivos. Nesse contexto, o presente projeto propõe a imobilização das enzimas NDKb de Leishmania major e sua mutante K30A em capilar de sílica, que posteriormente serão acopladas no método multidimensional a ser desenvolvido e validado. (AU)