Terapia gênica para a deficiência de hormônio de crescimento mediada pela eletrotransferência de minicírculos de DNA em camundongos anões

Resumo

Terapia Gênica é um tipo promissor de tratamento para doenças hereditárias e adquiridas, mediante a entrega de genes nas células-alvo para restaurar ou promover funções celulares específicas. Apesar do potencial da terapia gênica, a utilização desta estratégia é definida pelo balanço entre segurança e eficiência. Embora vetores derivados de vírus possuam uma alta eficiência na entrega do DNA em comparação com vetores não-virais, seu uso é limitado devido às respostas imunes indesejáveis ao capsídeo viral das proteínas, regeneração da virulência dos vírus e outros. Em contraste, vetores não-virais são seguros e fáceis de produzir em larga escala. Entretanto a duração da expressão proteica utilizando vetores não-virais é transiente, com duração de somente poucos dias, seguido de um período prolongado de baixos níveis de expressão, que pode estar relacionado à dificuldade do DNA exógeno de ultrapassar a membrana celular até atingir o núcleo. Uma nova geração de vetores de DNA chamado de minicírculo, possui um tamanho reduzido devido à ausência de algumas sequências bacterianas (bacterial backbone) e é potencialmente mais seguro que os plasmídeos utilizados atualmente em terapia gênica. Minicírculos combinados aos métodos físicos, como eletrotransferência, proporcionou uma alta eficiência de transferência gênica comparado com vetores não-virais convencionais. Minicírculos são uma alternativa promissora aos plasmídeos de DNA para a terapia gênica não-viral em termos de biossegurança, melhora da transferência gênica e biodisponibilidade devido ao seu tamanho reduzido. Neste trabalho pretendemos construir minicírculos que expressem hormônio de crescimento humano (hGH) ou murino (mGH) para a eletrotransferência em camundongos anões, além de estudar a possibilidade desta metodologia de terapia gênica não-viral para a deficiência de GH. (AU)