Efeito das oncoproteínas de HPV16 nas vias de reparo de dano ao DNA em culturas organotípicas de queratinócitos humanos

Resumo

Alguns tipos de HPV, conhecidos coletivamente como HPV de alto risco, estão etiologicamente associadas com quase a totalidade dos cânceres da cérvice uterina e com mais de 50% de outros cânceres anogenitais. A infecção por estes tipos de vírus tem sido associada à presença de instabilidade genômica, uma característica comum à maioria dos cânceres humanos. Os HPV de alto risco expressam duas oncoproteínas, E6 e E7, que agem sobre fatores celulares específicos promovendo proliferação celular. Estas proteínas são capazes de induzir alterações cromossômicas numéricas e estruturais. Além disso, podem modular a resposta da célula à presença de dano no DNA. A letalidade sintética descreve uma condição celular na que duas (ou mais) mutações não alélicas e não essenciais, que não são letais individualmente, tornam-se mortais quando presentes na mesma célula. Células transformadas por HPV de alto risco constituem modelos de particular interesse para o estudo de letalidade sintética, uma vez que as oncoproteínas E6 e E7 agem em várias vias de transdução de sinal, como por exemplo, as reguladas por p53 e pRb. No presente projeto propomos inibir sistematicamente genes envolvidos nos sistemas de reparo de dano ao DNA e genes supressores de tumor utilizando bibliotecas de lentivírus que expressam shRNA específicos. Esta abordagem poderá contribuir à identificação de genes essenciais para a sobrevivência de células transformadas por HPV. Mais ainda, além de abrir possibilidades para desenvolver novas estratégias para o tratamento de lesões associadas a este vírus, as bibliotecas de lentivírus e a informação gerada nesse projeto poderão ser aplicadas ao estudo de outros tumores de etiologia viral ou não.