Uso de modelos de membrana para estudar o mecanismo de ação de peptídeos antimicrobianos e efeitos da dimerização e ciclização

Resumo

Filmes de Langmuir e vesículas são úteis para mimetizar uma membrana celular, e investigar a interação com fármacos cuja atividade biológica pode ser correlacionada com os efeitos induzidos na membrana. Neste Projeto, estudaremos a atividade biológica de peptídeos antimicrobianos (PAMs) e seu mecanismo de ação com filmes de Langmuir e vesículas unilamelares de diferentes composições lipídicas para mimetizar biomembranas de bactérias e células de mamíferos. Os PAMs foram selecionados porque apresentam atividade contra microrganismos e células tumorais, com seletividade e baixa probabilidade de induzir resistência. Como peptídeo de partida será usado o dímero do peptídeo Magainina 2, (MG2)2K, que tem atividade 16 e 8 vezes a da sua versão monomérica para Escherichia coli e Stafilococos aureus, respectivamente. Versões diméricas e cíclicas deste e outros peptídeos serão sintetizadas, e estudadas em relação ao efeito dessas modificações na atividade contra patógenos nosocomiais multirresistentes e células tumorais. A interação dos peptídeos com as monocamadas será investigada obtendo-se isotermas de pressão de superfície, espectroscopia no infravermelho com modulação da polarização (PM-IRRAS) e microscopia no ângulo de Brewster, enquanto a interação com as vesículas será determinada com microscopia de contraste de fase e fluorescência. Com a combinação dessas técnicas espera-se contribuir com o desenvolvimento de novas moléculas bioativas e dados relevantes sobre seu mecanismo de ação.