Determinação da interação física requerida na montagem do complexo R2TP usando técnicas biofísicas e bioquímicas

Resumo

Hsp90 é uma chaperona molecular altamente conservada, amplamente distribuída e essencial envolvida na homeostase proteica. Devido ao grande numero de interatores ou proteínas clientes (mais de 600, incluindo oncoproteínas), a Hsp90 atua como papel chave na célula e é considerada um alvo terapêutico contra o câncer. Em 2005, o grupo do Dr. Houry descobriu um complexo interator da Hsp90, ao qual foi dado o nome de Complexo R2TP. Esse complexo é essencial para a fisiologia celular, modulação de vias envolvidas com crescimento e ciclo celular, biogênese dos ribossomos e na manutenção do genoma. O complexo R2TP humano é formado pelas proteínas Rvb1, Rvb2, PIH1D1 e RPAP3, com a RPAP3 mediando a interação entre o complexo R2TP e a Hsp90. A Hsp90 é essencial para a estabilidade e função do complexo. Porém, o mecanismo exato pelo qual Hsp90-R2TP humano interagem é pouco entendido. Neste projeto nós propomos abordar essa questão estudando a interação entra a Hsp90 e RPAP3 usando técnicas como Ressonância Plasmônica de Superficie e Calorimetria de Titulação Isotérmica. Além disso, o mapeamento da interação Hsp90-RPAP3 será feito por Cromatografia de Exclusão Molecular Analítica e Pull-down. Esse estudo tem grande importância no entendimento da montagem do complexo hsp90-R2TP humano e será de grande valia para a candidata desenvolver suas habilidades no campo da bioquímica e biofísica de proteínas. O conhecimento que será adquirido no intercâmbio de pesquisa em Toronto a ajudará a determinar os efeitos causados na montagem de complexos Hsp90-cochaperonas pelos ligantes (-)-Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) e curcumina em seu projeto no Brasil. (AU)