A função da proteína cinase Nek5 em células normais e cancerígenas: da identificação de substratos fisiológicos ao desenvolvimento de novos inibidores

Resumo

O material genético está sob constante agressões endógenas ou exógenas que induzem lesões no DNA. Para a proteção e/ou reparo destas lesões, as células possuem diferentes respostas que direcionam para a remoção através do reparo de DNA, ou tolerância a lesões, de forma que o material genético possa ser replicado apesar dos danos. A importância destes mecanismos é atestada, não somente pelo alto grau de conservação evolutiva, mas também pela existência de problemas genéticos relacionados a defeitos nestes mecanismos de reparo que resultam em carcinogênese, problemas no desenvolvimento e neurodegeneração. Análises funcionais de proteínas da família de proteínas Neks - Nima Related Kinases, especialmente de interação entre proteínas, destacaram o papel das Neks durante o ciclo celular e em vias de reparo de dano de DNA. Dentre os membros da família das Neks, Nek5 é a cinase mais negligenciada. Demonstramos recentemente que ela está envolvida no processo de morte celular através de defeitos na cadeia respiratória mitocondrial e formação de espécies reativas de oxigênio. Adicionalmente, esta proteína possui um papel em vias de reparo a danos de DNA (artigo em preparação em anexo), podendo levar a ativação de cinases importantes para o processo de reparo como ATM (pATM) e Chk2 (pChk2). Assim, parte importante deste projeto será a caracterização do mecanismo de ação da Nek5 em vias de reparo de DNA com foco especial na identificação dos seus substratos fisiológicos (Abordagem "Shokat" de geração de cinases sensitivas a análogos de ATP). Além do estudo da função fisiológica da Nek5, estudaremos também as alterações das suas funções causada por mutações no seu gene encontradas em diferentes cânceres humanos e ainda realizaremos estudos de triagem em bioensaios de inibidores com potencial uso anti-câncer. (AU)