Identificação e caracterização de mRNAs responsivos à leucina no músculo esquelético de ratos submetidos à imobilização a partir de sequenciamento em larga escala

Resumo

A Atrofia Muscular é considerada atualmente como um fator importante para a morbidade e mortalidade de pacientes. Dessa forma, o desenvolvimento de estratégias que melhorem a capacidade muscular e sejam capazes de reduzir sintomas da atrofia, é um dos maiores desafios na área de pesquisa com músculos esqueléticos. Nesse sentido, o nosso laboratório tem investigados os efeitos anti-catabólicos da leucina envolvidos no controle da massa muscular esquelética. A leucina, classificada como um aminoácido de cadeia ramificada é como um potente agente farmacológico com capacidade de atuar prevenindo o catabolismo em situações de Atrofia Muscular. Estudos recentes de nosso grupo de pesquisa demonstraram que ratos suplementados diariamente com leucina apresentaram redução da perda de massa do músculo soleus e, também, redução da perda da área de secção transversa após 7 dias de imobilização. Esse efeito anti-atrófico da leucina foi atribuído à redução da expressão gênica de componentes chaves do sistema proteolítico Ubiquitina-proteassoma, atrogin-1 e MuRF1. Por outro lado, é possível que outros fatores e vias de sinalização estejam envolvidos no efeito anti-atrófico de leucina. Portanto, o objetivo desse projeto é realizar um estudo prospectivo, utilizando simultaneamente a recente técnica de sequenciamento de mRNA em larga escala. Além disso, apesar de recente, o sequenciamento em larga escala está bem estabelecido como uma ferramenta útil para a identificação de genes, vias e mecanismos responsivos, principalmente porque pode ultrapassar as pistas normalmente advindas do conhecimento adquirido em Biologia Celular e Molecular. Nesse projeto, pretendemos analisar a expressão de Trib3, uma pseudokinase conhecida por atuar em diversas funções celulares. Nas análises preliminares, encontramos que sua expressão foi aumentada após três dias de imobilização e reduzida após a suplementação com leucina. Nesse sentido, diversos estudos têm mostrado uma ligação de Trib3 com aumento da resistência a insulina, além de aumentos em sua expressão após o uso de dietas pobres em leucina. (AU)