Investigação da Participação de IRS2 na patogênese de neoplasias mieloproliferativas JAK2V617F utilizando modelos murinos

Resumo

A mutação JAK2V617F é identificada em grande parte dos pacientes com neoplasias mieloproliferativas (NMP), sendo considerada o paradigma diagnóstico para esta classe de doenças. Mutações adicionais em MPL e CALR, que participam da ativação da via JAK/STAT, são marcadores de diagnóstico para aproximadamente 80% dos pacientes JAK2 negativos. Inibidores da via JAK/STAT representam um avanço terapêutico no tratamento das NMP, mas a falha em induzir remissão completa da doença indica a necessidade de estudos que identifiquem vias colaterais anormalmente ativadas. Nosso grupo de pesquisa identificou que, em células HEL JAK2V617F, o substrato do receptor de insulina-2 (IRS2) se associa a JAK2, e que o silenciamento de IRS2 reduziu a proliferação celular, induziu a apoptose e apresentou efeito aditivo ao inibidor seletivo de JAK1/2 ruxolitinibe. Propomos identificar a participação de IRS2 na patogênese das NMP através da utilização de (a) um modelo murino knockin para a mutação JAK2V617F e knockout para o Irs2 (Irs2-/-), (b) modelo de NMP sistêmica induzida por células Ba/F3 JAK2V617F silenciadas ou não para o Irs2 e (c) modelo de xenotransplante induzidos por células HEL JAK2V617F silenciadas ou não para o IRS2. Os modelos murinos serão submetidos a avaliação da sobrevida, avaliação da carga tumoral por bioluminescência, avaliação da capacidade de autorrenovação ex vivo, avaliação da capacidade de autorrenovação da célula tronco hematopoética, avaliação da proliferação e apoptose celular e/ou avaliação da ativação das vias de sinalização celular JAK/STAT, PI3K/AKT/mTOR e MAPK.