Estudo de vias alternativas aos sistemas LiaFSR e YycFGHIJ que levam à diminuição da sensibilidade à daptomicina em Enterococcus faecium

Resumo

Daptomicina é uma das últimas alternativas de tratamento para infecções causadas por enterococos resistentes à vancomicina (VRE), principalmente em E. faecium do complexo clonal 17, denominados "de alto risco". No entanto, resistência e falha terapêutica já foram observados e genes com mutações como liaFSR e yycFGHIJ tem sido sugeridos como responsáveis. Porém, o mecanismo de resistência não está concluído, pois amostras sensíveis com mutações em tais genes já foram encontradas e, por outro lado, nem sempre estes genes estão mutados em amostras resistentes. Além disso, o fato de se demonstrar sobrevivência de E. faecalis em daptomicina após a mudança da composição da sua membrana ocasionada pela incorporação de ácidos graxos dos meios onde foram incubados é uma novidade que não está bem explicada e nada se sabe sobre isso em E. faecium. Recentemente, nosso grupo identificou 3 isolados de E. faecium não sensíveis à daptomicina e, dentre várias sensíveis, identificamos uma "supersensível" com CIM muito abaixo da CIM90 da literatura. Pretende-se estudar os mecanismos envolvidos nas amostras resistentes baseados no que já se tem na literatura e selecionar amostras resistentes in vitro a partir da "supersensível" para se determinar novas vias de resistência por sequenciamento dos genomas e posterior superexpressão de genes mutados. Além disso, as amostras selecionadas in vitro e a parental sensível serão caracterizadas quanto à capacidade de despolarização e fluidez da membrana, espessura da parede celular, formação de biofilme, cinética do tempo de morte com daptomicina e de sinergismo com ampicilina. (AU)