Caracterização do fosfoproteoma envolvendo MAP quinases (MpkC, SakA e MpkA) de Aspergillus fumigatus mediante diferentes condições de estresse

Resumo

Aspergillus fumigatus é um fungo patogênico oportunista e alergênico responsável por cerca de 65% das infecções fúngicas em humanos e por causar uma série de patologias em indivíduos imunocomprometidos, incluindo a aspergilose invasiva. A. fumigatus possui quatro MAPK descritas: MpkA, reguladora central da via de sinalização da parede celular (CWI, Cell Wall Integrity) e com atuação na resposta a estresse oxidativo; MpkB, ainda não caracterizada; MpkC e SakA, ortólogos de Hog1 de S. cerevisiae, uma quinase reguladora da resposta a estresse osmótico por glycerol (osmolarity glycerol response, HOG pathway). Estudos atuais estão interessados na investigação do papel de MAPKs na modulação de vias de sinalização ativadas por moléculas indutoras de estresse no fungo, como sorbitol ou congo-red e caspofungina, por exemplo. Foi recentemente demostrado uma grande atuação de ortólogos de Hog1 (SakA e MpkC) na resposta a diferentes estresses celulares, como estresse osmótico e oxidativo, podendo também atuar na resposta a adaptação a caspofungina e na utilização de fontes de carbono respectivamente. Além disso, a quinase MpkA foi identificada como moduladora da sinalização desencadeada no fungo durante o tratamento com caspofungin. Análises de proteoma e fosfoproteoma consistem em importantes estratégias para a identificação de redes de interação e sinalização moduladas por fosforilação durante um estresse sofrido pelo organismo. Dessa forma, o presente projeto tem como principais objetivos analisar os fosfoproteomas de mutantes nulos de três MAPKs apresentadas (MpkA, MpkC e SakA) mediante os respectivos estresses: tratamento com sorbitol (estresse osmótico) e caspofungin e Congo red (dano a parede celular), a fim de se identificar novos elementos da sinalização celular mediada por MAPKs na reposta do fungo as condições ambientais.