Caracterizaç'ão molecular dos fatores de transcriç'ão htlA e fhdA do fungo patogênico humano Aspergillus fumigatus

Resumo

Aspergillus fumigatus é um fungo saprófita e um dos principais fungos patogênicos humanos. Os seus conídios são inalados e chegam ao pulmão, onde se tornam ativos e germinam, dando origem a uma doença conhecida como aspergilose. A aspergilose apresenta grande risco, principalmente, para indivíduos imunossuprimidos. As equinocandinas, como a caspofungina, são antifúngicos cujo alvo é a parede celular do fungo. Esses agentes reduzem a concentração total de 1,3-²-D-glucanos na parede da célula, através da inibição da atividade da 1,3-²-glucano sintase. Curiosamente, a inibição da síntese de um tipo de polissacarídeo presente na parede celular pode levar ao aumento de outro, o que presumivelmente representa um mecanismo de defesa que permite a célula escapar da letalidade. Esse fenômeno, denominado efeito paradoxical, é resultado da atenuação da atividade das equinocandinas em elevadas concentrações. Entretanto, a caspofungina possui um excelente perfil de segurança e está sendo cada vez mais usada como terapia de segunda linha contra fungos. As equinocandinas são capazes de induzir um conjunto de genes relacionados a via da proteína quinase C que mantém a integridade da parede celular. Além disso, o aumento compensatório da quitina é coordenado pela PKC, HOG e via da calcineurina. A inibição da síntese de componentes da parece celular através de drogas antifúngicas pode ser um alvo importante contra infecções causadas por A. fumigatus. Dessa forma, foi utilizada uma biblioteca de 395 fatores de transcrição deletados, com o intuito de se encontrar fatores de transcrição relacionados a sensibilidade a caspofungina e dois mutantes, ”hltA (Afu5g10620) e ”fhdA (Afu7g05440), foram selecionados. Os resultados preliminares com as análises fenotípicas em meio mínimo sólido mostraram maior sensibilidade de ambos os mutantes nulos a elevadas concentrações de caspofungina (16 ¼g/mL). Na presença de 5 mM de EGTA, 0,25 ¼g/mL de Caspofungina e à 44oC, o mutante ”fhdA mostrou-se mais sensível que o tipo selvagem. Nas mesmas condições de 0,25 ¼g/mL de Caspofungina e 44oC, o mutante ”hltA também apresentou-se mais sensível. Sendo assim, mais estudos são necessários para confirmar o papel desses fatores de transcrição na resposta adaptativa do fungo à caspofungina. (AU)