Identificação e determinação da função de uma proteína oxidorredutase em Leishmania amazonensis

Resumo

A Leishmania é um protozoário causador leishmaniose, doença que apresenta manifestações clínicas que vão de lesões cutâneas a viscerais, dependendo da espécie do parasita e condições imunológicas do hospedeiro. A Leishmania é auxotrófica para L-arginina e possui a maquinaria para sua tomada e metabolismo. O aminoácido é substrato comum para as enzimas arginase, na produção de poliaminas, e óxido nítrico sintase (NOS), na produção de óxido nítrico (NO). A atividade de arginase é essencial para a sobrevivência de Leishmania amazonensis (La-WT), assim como a produção de NO para a metaciclogênese e diferenciação das formas amastigotas. Ainda, o nocauteamento da arginase alterou a produção de NO nas formas promastigotas e amastigota de L. amazonensis (La-arg-). Este projeto está baseado na hipótese de que L. amazonensis altera a expressão do gene que codifica a proteína oxidorredutase, cujo o homólogo em Leishmania mexicana é LmxM19.1450, oxidoreductase-like protein- GI 401419669 -,localização 2973-4725, KEGG 1.14.13.39, uma enzima NOS-like, que pode ser responsável pela produção de NO pelo parasita, nas diferentes partes da curva de crescimento das formas promastigotas em cultura e durante a diferenciação para formas amastigotas,. A fim de corroborar essa hipótese, serão realizados experimentos para a identificação do homólogo da oxidorredutase LmxM19.1450 em L. amazonensis seguida da avaliação da expressão de seu transcrito nos modelos La-WT e La-arg-nas formas promastigotas e amastigotas. A obtenção de uma Leishmania com superexpressão da oxidorredutase poderá demonstrar sua função na condição de privação de L-arginina. (AU)