Efeitos de peptídeos relacionados ao inibidor quimérico recombinante de Bauhinia bauhinioides, rBbKIm, e à lectina da casca de Crataeva tapia, CrataBL, no modelo de Câncer de Melanoma

Resumo

Dentre os tipos de Câncer que mais acometem os seres humanos se destaca o melanoma, Câncer de Pele maligno desenvolvido em melanócitos, no qual apresenta uma alta letalidade. Uma vez diagnosticado tardiamente e devido a uma falta de quimioterápicos eficientes no mercado, faz-se necessário a pesquisa por novas drogas. A estimativa de novos casos para Câncer de Pele melanoma para o biênio 2018-2019 será de 2.920 casos para homens e de 3.340 casos para mulheres, de acordo com o INCA. Nos Cânceres em geral, a proteólise é facilitada por proteases de células tumorais que são secretadas ou ligadas à sua superfície. A superexpressão ou ativação de uma protease fornece um ambiente proteoliticamente ativo que circunda o tumor. Os inibidores dessas atividades, em especial, os inibidores de proteases encontrado em leguminosas, mostram ser potenciais candidatos para o controle destes eventos por bloquearem a progressão do Câncer. Os inibidores presentes em leguminosas caracterizados pelo grupo da Profa. Maria Luiza Oliva apresentam características atípicas tanto em relação aos aspectos estruturais quanto funcionais e estão sendo utilizados em modelos de inflamação, trombose e Câncer. O grupo também construiu uma forma quimérica (Sumikawa et al., 2010) denominada rBbKIm (Bauhinia bauhinioides Kallikrein inhibitor modified) cuja estrutura base é a do inibidor presente em B. bauhinioides mas modificado de modo a conter as sequências EPVARGDG (posição 21-28) e DRGE (posição 127-130) de BrTI (inibidor caracterizado de B. rufa por Nakahata et al., 2006). O efeito deletério desta proteína nas linhagens tumorais DU145 e PC3 de próstata foi constatado por Ferreira et al., 2014. Estudos por nós já iniciados mostram que rBbKIm é capaz de inibir as calicreínas teciduais KLK 6 e 7, serino protease com importante papel no desenvolvimento de melanoma (Thierauf et al., 2017; Delaunay et al., 2017). Ainda, outro inibidor a CrataBL (proteína Crataeva tapia Bark Lectin, extraída da entrecasca da árvore Crataeva tapia) por ser uma lectina, apresenta uma especificidade a oligossacarídeos sulfatados presente em proteínas glicosiladas super expressas no microambiente tumoral, responsáveis pela progressão do tumor. Por ser um inibidor de protease, foi relatado sua eficácia na inibição da adesão e invasão de células de glioblastoma de linhagem U87 e sua indução na apoptose em células de Câncer de Próstata de linhagens DU-145 e PC-3. Foi também determinada a sua sequência de aminoácidos e estrutura tridimensional assim como caracterizada sua seleção quanto às propriedades bioquímicas e biológicas. A sua eficácia no bloqueio da coagulação e na formação do trombo arterial, sem aumento no tempo de sangramento também foi descrita pelo grupo. Desta forma, este projeto propõe ampliar os estudos, utilizando os dois inibidores de proteases isoladamente ou em tratamento combinado, além de utilizar fragmentos das estruturas dos inibidores sobre as células de melanoma humano SK-MEL-28, na tentativa de estabelecer os mecanismos envolvidos e a relação entre a estrutura e os parâmetros cinéticos de inibição com as proteases alvo. (AU)