Fibras biocompatíveis de nanotubos de carbono para determinação de anandamida e 2-araquidonoilglicerol em encéfalo de rato por in vivo SPME-LC-MS/MS

Resumo

Os compostos N-araquidonoil-etanolamina (AEA) e 2-araquidonoilglicerol (2-AG) são os principais representantes da família dos endocanabinóides (EC), um grupo de neurotransmissores que atuam em processos de sinalização através da ativação dos receptores canabinóides do tipo 1 e tipo 2 (CB1 e CB2). Dado o papel que a AEA e 2-AG desempenham nas transmissões sinápticas no cérebro, eles têm sido extensivamente estudados como potenciais biomarcadores de doenças neurodegenerativas, como a Doença de Parkinson (DP). A DP é uma desordem neurodegenerativa caracterizada pela perda dos neurônios dopaminérgicos, ocasionando disfunções motoras. Estudos clínicos realizados em modelos animais da DP e em amostras biológicas obtidas de pacientes com DP indicam que estes indivíduos apresentam concentrações elevadas de AEA e 2-AG quando comparado a indivíduos saudáveis, o que sugere que esses ECs são potenciais biomarcadores dessa patologia.A quantificação de AEA e 2-AG tem sido realizada tipicamente em amostras biológicas por metodologias in vitro ou ex vivo. Entretanto, essas metodologias empregadas não podem indicar ou prever com precisão os complexos processos que ocorrem em organismos vivos. A amostragem in vivo elimina erros relacionados à degradação ou perda de analitos de vida curta ou instáveis, uma típica desvantagem dos métodos convencionais de preparo de amostras. Esse projeto visa desenvolver um inovador método combinando as técnicas de microextração em fase sólida (SPME) in vivo e LC-MS/MS para determinar AEA e 2-AG em cérebro de ratos vivos, conscientes e em livre movimento. Para que esse objetivo seja alcançado, uma fibra SPME revestida com nanotubos de carbono (CNTs) biocompatível será desenvolvida, avaliando-se diferentes estratégias de revestimento e materiais biocompatíveis. A alta área superficial e excelente capacidade de adsorção dos CNTs proporcionarão a eficiente extração dos analitos, enquanto que a camada biocompatível evitará que as macromoléculas da matriz sejam adsorvidas.Esse projeto BEPE está associado ao projeto de doutorado desenvolvido no Brasil, o qual tem como objetivo a determinação de biomarcadores em amostras biológicas obtidas de indivíduos com doenças neurodegenerativas.