Duas famílias de proteínas reguladoras do ciclo celular: de estudos funcionais e uso como novos marcadores diagnósticos e alvos terapêuticos em câncer

Resumo

O câncer é uma das doenças que mais vitimizam humanos e animais domésticos. De acordo com o tecido e a célula afetada pelas mutações, um número grande de subtipos de câncer pode ser diferenciado. Num dado subtipo específico de câncer as causas moleculares são bastante heterogêneos e na maioria dos casos somente marginalmente mapeados. Isso representa, ao mesmo tempo, o maior desafio atual na área, mas também oferece imensas novas oportunidade para o diagnóstico e para novas abordagens terapêuticas. Proteína quinase de vias de sinalização e proteínas reguladoras da proliferação em geral são frequentemente alvos de mutações ativadoras ou inativadoras em câncer e contribuem para o processo de transformação. Nesse projeto focamos em duas famílias de proteínas reguladoras com grande potencial de utilidade tanto para o diagnóstico como para a terapia de câncer. A primeira família é representada pelas menos estudadas Neks1,4,6,8,10 e 11, envolvidos na regulação do ciclo celular, da mitose, do cílio primário, mecanismos de reparo de DNA e funções mitocondriais. A segunda família consiste de duas proteínas humanas reguladoras, chamadas HABP4 e SERBP1, que tem papéis na regulação da transcrição e expressão gênica, na proliferação, e na reposta celular a stress. O objetivo central dessa proposta é o estudo funcional molecular dessas proteínas na célula e a caracterização do efeito de mutações pontuais nos seus genes, observados em câncer. Com técnicas de imunohistoquímica e métodos de análise de transcritoma caracterizaremos o perfil de expressão dessas proteínas e seus mRNAs respectivas em diferentes tipos de câncer, para identificar em qual câncer cada proteína serve com marcador molecular, diagnostico e prognostico, e para obter novas pistas sobre alvos terapêuticas. Teremos modelos de knock out gênico (Crispr Cas9) e super-expressão dessas proteínas em cultura de células 2D e 3D. Estudos estruturais de modelagem e ensaios bioquímicos da inibição de atividade de cinases no caso das Nek quinases permitirão ainda a descoberta e o desenvolvimento de novos inibidores para as Neks e seu uso como novos insumos para o tratamento de câncer. (AU)