Envolvimento da síntese de colesterol na progressão da Doença Hepática não Alcoólica

Resumo

NAFLD representa um grupo heterogêneo de doenças hepáticas que podem variar de uma simples esteatose (NAFL, acúmulo de lipídeos excedendo 5 a 10% da massa hepática), a condições mais severas como a esteatohepatite (NASH), cirrose e o hepatocarcinoma celular (HCC). Em um estudo preliminar nós encontramos que o desenvolvimento da NAFL e progressão para NASH induzidos pela deleção de PTEN em hepatócitos está associado com um aumento na síntese de ácidos graxos, colesterol e ceramidas no fígado. Estes dados nos motivaram a investigar durante o mestrado os efeitos da inibição da síntese de colesterol com atorvastatina no desenvolvimento da NAFL e progressão para NASH induzidas geneticamente pela deleção de Pten em hepatócitos. Os dados obtidos até o momento sugerem que a inibição da síntese e acúmulo de colesterol protege parcialmente da esteatose, fibrose e inflamação hepáticas características da NASH induzida pela deleção de Pten em hepatócitos. Assim no doutorado direto, nós investigaremos os mecanismos moleculares envolvidos nas ações protetoras da atorvastatina no desenvolvimento da NAFL e NASH induzidas pela deleção de Pten em hepatócitos. Testaremos também os efeitos da inibição da HMGCR com atorvastatina em um segundo modelo de NAFL e NASH induzidos pela ingestão de dieta rica em frutose associada a tratamento com o carcinogênio CCL4. Em um terceiro protocolo investigaremos a participação específica da via do NLRP3-inflamassoma nos efeitos deletérios do colesterol no fígado. Nestes protocolos, camundongos serão avaliados para o peso corporal, consumo alimentar e eficiência energética, homeostase da glicose (GTT, ITT, PTT), massa e histologia hepática (H/E), fibrose (Picrosirius), inflamação (conteúdo de citocinas TNFa, IL-1b, IL-6 e IL-10), sinalização intracelular da insulina (Western blot Akt total e fosforilada), lipidoma (espectrometria de massas), perfil de expressão gênica (qPCR), síntese de ácidos graxos, colesterol e glicerol 3-fosfato, e atividade de enzimas chave envolvidas nestes processos (FAS, ACC, ACLY, PEPCK e GyK, entre outras). (AU)