Estudo do efeito dos peptídeos pQYP e QEP em interações proteicas e vias de sinalização no gânglio da raiz dorsal de camundongos.

Resumo

O peptídeo TAT-pQYP foi desenhado para inibir a interação da PLC gama com a TrkA (Moraes et. al. 2022).Dados recentes de proteômica demonstram que o peptídeo TAT-pQYP se liga a outras proteínas com domínios SH2 além da PLCg. Como por exemplo a ubiquitina ligase Cbl.(projeto de iniciação cientifica da bolsista FAPESP Heloisa Ramos). Modificações do peptídeo TAT-pQYP como por exemplo uma substituição da tirosina fosforilada (pY) por um ácido glutâmico (E) peptídeo denominado de (QEP)também se liga ao domínio N-SH2 da PLC¿¿ mantendo a atividade de diminuição da hipernocicepção mecânica perante um estímulo inflamatório com fator de crescimento neural (NGF). O presente trabalho visa validar a interação do peptídeo pQYP ou QEP com outras proteínas utilizando gânglios da raiz dorsal (DRG) de camundongos. Além disso, visa-se verificar o efeito dos peptídeos (TAT-pQYP e TAT-QEP) em vias de sinalização no DRG de animais recém-nascidos e adultos perante a adição de NGF verificando se esses afetam o crescimento de neuritos. Visa-se estabelecer um modelo de entrega de peptídeo QEP por vírus retrogrado visando ter neurônios como os principais alvos e verificar o efeito desse vírus em vias dias sinalização in vitro e em DRG de animais tratados. Posteriormente visa-se estabelecer um sistema de entrega de vírus a modelos de dor crônica como ligação parcial do nervo ciático (PSNL) ou osteoartrite. Dessa forma saberemos o efeito do peptídeo pQYP e QEP em diferentes vias de sinalização perante o estimulo com NGF em animais com ou sem dor... a cisteínas pode resultar em fragmentos específicos e futuramente pequenas moléculas específicas para os diferentes domínios SH2 que ligam os peptídeos TAT-pQYP e QEP podendo elucidar mais especificamente o papel de proteínas envolvidas nessas ligações. Ensaios de binding auxiliarão na validação dessas interações e em culturas de gânglio da raiz dorsal (DRG) poderemos compreender melhor o significado da modulação das interações do TAT-pQYP e QEP com pequenas moléculas com diferentes domínios SH2.