Desenvolvimento de Ferramentas de Biologia Química para Avançar o Estudo e a Descoberta de Fármacos para as Quinases Serina/Treonina de Mycobacterium tuberculosis

Resumo

A tuberculose (TB), causada pela Mycobacterium tuberculosis (Mtb), continua sendo uma das principais doenças infecciosas, resultando em 1,3 milhão de mortes anuais. O aumento da tuberculose multirresistente (MDR) e resistente à rifampicina (RR) destaca a necessidade urgente de estratégias terapêuticas inovadoras. A capacidade da Mtb de sobreviver dentro de macrófagos hospedeiros depende de redes de sinalização, incluindo 11 quinases de serina/treonina (STPKs), que regulam processos essenciais, como a biossíntese da parede celular, adaptação metabólica, evasão imunológica e respostas ao estresse. Entre elas, PknA e PknB são fundamentais para a sobrevivência bacteriana, coordenando a divisão celular, a integridade do envelope celular e a regulação metabólica. Apesar de sua importância, os papéis da maioria das STPKs e suas vias de sinalização ainda são pouco compreendidos. Este projeto busca preencher essas lacunas de conhecimento desenvolvendo ferramentas e recursos para o estudo abrangente das STPKs de Mtb. Aproveitando a experiência do nosso grupo em bioquímica e biologia estrutural de quinases, os objetivos do projeto incluem: (1) produzir proteínas recombinantes para as 11 STPKs de Mtb, com foco nos seus domínios quinase citoplasmáticos; (2) desenvolver ensaios bioquímicos robustos para medir a atividade das quinases e testar inibidores; (3) identificar e caracterizar inibidores a partir de bibliotecas químicas diversas, utilizando ensaios de variação térmica e ensaios bioquímicos baseados em atividade; e (4) determinar as estruturas co-cristalizadas das STPKs ligadas aos inibidores identificados por cristalografia de raios X. Esperamos que nossos resultados forneçam ferramentas e dados para avançar o entendimento da biologia das quinases da Mtb e estabeleçam a base para o desenvolvimento de novas terapias contra a tuberculose, especialmente cepas multirresistentes. (AU)