Synthetic and minimalist vectors for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of fungi

Autor(es)

Luísa Czamanski Nora ^[1] ; Relber Aguiar Gonçales ^[2] ; Leonardo Martins-Santana ^[3] ; Beatriz Henriques Ferreira ^[4] ; Fernando Rodrigues ^[5] ; Rafael Silva-Rocha ^[6]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade de São Paulo. Departmento de Biologia Celular e Molecular Biology e Bioagentes Patogênicos. Systems and Synthetic Biology Laboratory - Brasil

^[2] Universidade de São Paulo. Departmento de Biologia Celular e Molecular Biology e Bioagentes Patogênicos. Immunochemistry and Glycobiology Laboratory - Brasil

^[3] Universidade de São Paulo. Departmento de Biologia Celular e Molecular Biology e Bioagentes Patogênicos. Systems and Synthetic Biology Laboratory - Brasil

^[4] University of Minho. Life and Health Sciences Research Institute (ICVS). School of Health Sciences - Portugal

^[5] University of Minho. Life and Health Sciences Research Institute (ICVS). School of Health Sciences - Portugal

^[6] Universidade de São Paulo. Departmento de Biologia Celular e Molecular Biology e Bioagentes Patogênicos. Systems and Synthetic Biology Laboratory - Brasil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY; v. 42, n. 2, p. 395-398, 2019-06-13.

Resumo

Abstract We present a collection of minimalist binary vectors for transformation through ATMT applicable to several fungi species. pLUO plasmid binary vectors consist of a reporter module containing fluorescent proteins, mCherry or eGFP, flanked by a multiple cloning site and a transcription terminator site. They also present a synthetic gene allowing resistance to Hygromicin B flanked by alternate promoters, one for yeast and another for filamentous fungi. Left and right borders were added for Agrobacterium tumefaciens recognition, and a minimal broad-host range RK2 replication origin. Transformation was validated in the pathogenic fungus Paracoccidioides lutzii. Hence, we developed an efficient and reliable molecular tool for fungal transformation: minimalist, synthetic, modular, and available in four different versions, and these can still be readily modified using a few primers and few cloning steps. (AU)

• Processo FAPESP: 16/03763-3 - Desvendando os mecanismos de regulação gênica a nível de células únicas em Trichoderma reesei
• Beneficiário: Luísa Czamanski Nora
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Processo FAPESP: 12/22921-8 - Abordagens de biologia sintética para decifrar os mecanismos de integração de sinais em promotores bacterianos complexos
• Beneficiário: Rafael Silva Rocha
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Processo FAPESP: 16/01946-3 - Construção de promotores sintéticos para expressão de celulases usando novos elementos cis-regulatórios em Trichoderma reesei
• Beneficiário: Leonardo Martins Santana
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Processo FAPESP: 14/22561-7 - Superexpressão da paracoccina: fenótipo e virulência de linhagens de Paracoccidioides brasiliensis
• Beneficiário: Relber Aguiar Gonçales
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado