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Coto, Amanda Lais de Souza ; Pereira, Arthur Alexandre ; Oliveira, Sabrina Dorta ; Moritz, Milene Nobrega de Oliveira ; da Rocha, Arthur Moraes Franco ; Dores-Silva, Paulo Roberto ; da Silva, Noeli Soares Melo ; Nogueira, Ana Rita de Araujo ; Gava, Lisandra Marques ; Seraphim, Thiago Vagas ; Borges, Julio Cesar

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS; v. 1872, n. 1, p. 12-pg., 2023-10-26.

Resumo

J-domain proteins (JDPs) form a very large molecular chaperone family involved in proteostasis processes, such as protein folding, trafficking through membranes and degradation/disaggregation. JDPs are Hsp70 cochaperones capable of stimulating ATPase activity as well as selecting and presenting client proteins to Hsp70. In mitochondria, human DjC20/HscB (a type III JDP that possesses only the conserved J-domain in some region of the protein) is involved in [FeS] protein biogenesis and assists human mitochondrial Hsp70 (HSPA9). Human DjC20 possesses a zinc-finger domain in its N-terminus, which closely contacts the J-domain and appears to be essential for its function. Here, we investigated the hDjC20 structure in solution as well as the importance of Zn+2 for its stability. The recombinant hDjC20 was pure, folded and capable of stimulating HSPA9 ATPase activity. It behaved as a slightly elongated monomer, as attested by small-angle X-ray scattering and SEC-MALS. The presence of Zn2+ in the hDjC20 samples was verified, a stoichiometry of 1:1 was observed, and its removal by high concentrations of EDTA and DTPA was unfeasible. However, thermal and chemical denaturation in the presence of EDTA led to a reduction in protein stability, suggesting a synergistic action between the chelating agent and denaturators that facilitate protein unfolding depending on metal removal. These data suggest that the affinity of Zn+2 for the protein is very high, evidencing its importance for the hDjC20 structure. (AU)

• Processo FAPESP: 20/15947-7 - Mapeamento e caracterização mecanística da interação da proteína humana HspA5 (BiP/Grp78/erHsp70) com a co-chaperona humana Hep1 e com a proteína Spike do Coronavírus SARS-CoV-2
• Beneficiário: Noeli Soares Melo da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 14/07206-6 - Estudos da HSP70 mitocondrial de humanos e de protozoários: abordagem estrutural e funcional
• Beneficiário: Julio Cesar Borges
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 17/26131-5 - Chaperoma: estudo da relação entre a estrutura dos seus componentes e a manutenção da proteostase
• Beneficiário: Carlos Henrique Inacio Ramos
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 14/16646-0 - Mortalina humana: interação com co-chaperonas, p53 e mutantes, cinética de agregação, regulação/modulação e secreção por vesículas
• Beneficiário: Paulo Roberto das Dores da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 21/02289-4 - Estudos estruturais das isoformas da co-chaperona ativadora da atividade ATPásica da HSP90 (Aha) de Plasmodium falciparum em complexo com a chaperona HSP90 e caracterização de seus papéis celulares
• Beneficiário: Thiago Vargas Seraphim
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 12/50161-8 - Estudo da estrutura e função da chaperona Hsp90 com ênfase no seu papel em homeostase celular
• Beneficiário: Carlos Henrique Inacio Ramos
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 19/22422-0 - Estudo funcional celular dos oligômeros de alta massa molecular da mortalina e dos efeitos das co-chaperonas mitocondriais na sua estrutura
• Beneficiário: Milene Nóbrega de Oliveira Moritz
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 17/07335-9 - Estudos das isoformas da HSP70 humana residentes no citoplasma e mitocôndria e de seus oligômeros de alta massa molecular: interação com co-chaperonas e proteínas clientes
• Beneficiário: Julio Cesar Borges
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular