Carcinogênese mamária induzida por DMBA em camundongos geneticamente modificados, deficientes em conexina 43

Resumo

As junções gap são canais protéicos comunicantes da membrana, formados por proteínas denominadas conexinas. A perda funcional de junções gap tem sido correlacionada com o processo de carcinogênese, através da diminuição da capacidade de comunicação celular e alterações na expressão ou localização das conexinas. O DMBA é um carcinógeno que desencadeia o desenvolvimento de neoplasias mamárias e tem sido utilizado na criação de modelos de carcinogênese química em camundongos. O objetivo deste projeto é estudar a interferência da ausência de um dos alelos do gene da conexina 43 na carcinogênese mamária induzida pelo DMBA. Para isto pretende-se administrar a dose total de 9 mgDkg por animal, fracionada a 1 mg/semana, a fêmeas de camundongos geneticamente manipulados heterozigotos (Cx43+/-) ou selvagens (Cx43+/+). A avaliação da interferência no processo será realizada por meio de análise qualitativa e quantitativa (macroscópica e histopatopatológica) dos tumores, e por meio das técnicas de imunohistoquímica para as conexinas 26 e 43, PCNA, e-caderina, receptores estrógeno e progesterona, citoqueratinas 5 e 14, vimentina, c-kit, e dos genes supressores de tumores PTEN e p53. A expressão das conexinas 26 e 43, no epitélio mamário neoplásico, será avaliada também por PCR em tempo real e Western Blot. Espera-se, desta forma, não somente verificar a influência da deficiência da conexina 43 no desenvolvimento das neoplasias mamárias, quanto caracterizar estas neoplasias do ponto de vista molecular. (AU)