UTILIZAÇÃO TERAPÊUTICA DE microRNAS RESPONSÁVEIS PELA REGULAÇÃO DA CONTRATILIDADE CARDÍACA ASSOCIADO AO TREINAMENTO FÍSICO AERÓBICO EM RATOS COM INSUFICIÊNCIA CARDÍACA

Resumo

A insuficiência cardíaca é uma síndrome complexa que envolve múltiplos sistemas e mecanismos compensatórios neuro-humorais, acompanhada de altos índices de morbidade e mortalidade. Estudos têm revelado importantes funções dos miRNAS em diferentes processos cardíacos, incluindo contratilidade dos cardiomiócitos, propiciando vislumbrar novos mecanismos regulatórios e potencial terapêutico para doenças cardíacas, como por exemplo na insuficiência cardíaca (IC). Uma vez que, o exercício físico promove melhora da contratilidade cardíaca além de outras adaptações benéficas ao Sistema Cardiovascular, a identificação de miRNAs específicos que modulam o processo de contratilidade cardíaca pode servir de base para uso terapêutico na IC. Com isso, o objetivo do presente estudo é traçar o perfil de microRNAs expressos no coração de ratos treinados e treinados infartados em esteira e testar a hipótese de que genes alvos dos microRNAs envolvidos com o processo de recaptação e liberação do cálcio no cardiomiócitos, diferencialmente expressos como efeito do treinamento físico possam ser silenciados ou superexpressos como terapia gênica associado ao treinamento físico no animal com IC. Para isso, os animais serão divididos em 4 grupos: Sham sedentário (Sh), sedentário infartado (SI), Treinado Sham (TSh) e Treinado infartado (TI). A função ventricular será acompanhada com ecocardiografia antes e após o período de treinamento para análise da função ventricular e após oito semanas do protocolo de corrida em esteira os animais serão sacrificados o RNA será extraído e traçado o perfil de miRNAs expressos no coração. Os microRNAs com maior ou menor expressão que estejam envolvidos com genes candidatos a regulação da contratilidade cardíaca serão selecionados por programas de bioinformática para construção de anti-miR ou miR-mímico e utilizados como terapia em animais com IC sedentários e submetidos ao treinamento físico. Para isso, serão utilizados mais seis grupos experimentais: Sedentário Sham (Sh), Sedentário infartado (SI), Sedentário tratados com miRNAs (S+Sc), Treinado Sham (TSh), Treinado infartado (TI) e Treinado tratados com miRNAs (T+Sc). As proteínas alvo consideradas importantes no processo de contratilidade serão selecionadas e a expressão protéica confirmadas por técnica de Western blotting. A função ventricular será acompanhada com ecocardiografia antes e após o período de treinamento e após oito semanas do protocolo de corrida em esteira serão realizadas novas medidas morfométricas (medida do comprimento, largura e volume celular) e de contratilidade em células cardíacas isoladas.