Treinamento físico aeróbio em camundongos selvagens e transgênicos para CETP não altera a remoção de colesterol celular e a expressão de genes envolvidos no fluxo de lípides em macrófagos e arco aórtico

Resumo

O exercício físico regular melhora o metabolismo de lípides e lipoproteínas, contribuindo para prevenção contra a doença cardiovascular. Estudos recentes evidenciam que o treinamento físico aeróbio acelera o transporte reverso de colesterol (TRC) em camundongos, por favorecer o fluxo de colesterol de macrófagos, mediado por HDL, para o plasma, fígado e fezes. Este evento associa-se com a maior expressão hepática dos receptores de HDL (SR-BI e ABCA-1) e LDL (B-E). Em macrófagos, entretanto, muito pouco é conhecido sobre o papel do exercício físico aeróbio regular na modulação do efluxo de colesterol, que caracteriza a primeira etapa do TRC. Sendo assim, o objetivo deste estudo é avaliar a influência do treinamento físico aeróbio em camundongos C57BL6 transgênicos para CETP humana sobre o transporte reverso de colesterol de macrófagos. Serão determinados em macrófagos isolados da cavidade peritoneal de animais treinados e sedentários: 1) a expressão do mRNA de ABCA-1, ABCG-1, SR-BI, LXRa/b e PPARg, 2) o conteúdo proteico de ABCA-1, ABCG-1, SR-BI, LXRa/b e PPARg; 3) o efluxo de 14C-colesterol, em diferentes intervalos de tempo, para apo A-I e subfrações de HDL e 4) a contribuição seletiva dos receptores de HDL para a remoção de colesterol celular. Os camundongos serão submetidos a treinamento físico aeróbio em esteira (15m/min; 30 min/dia), por 6 semanas e um grupo controle será mantido sedentário. No período basal e final do protocolo serão determinadas as concentrações plasmáticas de colesterol total, triglicérides, a atividade da CETP, o perfil de lipoproteínas por cromatografia rápida para separação de proteína (FPLC), e o peso corporal. O mRNA de diversas proteína envolvidas no TRC será determinado em macrófagos isolados do peritônio dos camundongos treinados e sedentários, por RT-PCR e, o conteúdo proteico, por citometria de fluxo ou imunoblot. Macrófagos peritoneais dos animais treinados e sedentários serão sobrecarregados com LDL acetilada e 14C-colesterol, seguindo-se exposição à AMP cíclico ou inibidores seletivos de ABCA-1 e SR-BI. O efluxo de colesterol, ao longo do tempo, será determinado nestas células após adição de apo A-I, HDL2 ou soro. Os achados serão importantes para detalhar a influência do exercício físico sobre o transporte reverso de colesterol em macrófagos em modelo animal que se assemelha ao transporte reverso em humanos.