Glicoxidação intracelular e estresse do retículo endoplasmático: efeito potenciais sobre os transportadores ABCA-1 e sobre o fluxo de lípides em macrófagos

Resumo

No Diabete Melito (DM), a formação de produtos avançados de glicação (AGE) prejudica o transporte de colesterol dos macrófagos arteriais ao fígado, contribuindo para a Aterosclerose. A albumina-AGE reduz a remoção de colesterol celular pelas HDL e apo A-l, por diminuir a expressão dos receptores de HDL, ABCA-1. Este evento não decorre de prejuízo na transcrição do gene do ABCA-1, tampouco de alterações na taxa de tradução inicial da proteína ou mRNA. Neste contexto, é possível que vias de degradação pós-traducionais possam contribuir para a redução do ABCA-1 em condições glicoxidativas. O objetivo do presente estudo é avaliar, em macrófagos, o efeito da albumina-AGE, modificada in vitro, e da albumina obtida do soro de pacientes diabéticos (alb-DM) com controle glicêmico inadequado, sobre o estresse Retículo Endoplasmático (RE) e vias da resposta a proteínas não enoveladas (UPR), bem como sobre a expressão da Proteína Dissulfeto Isomerase (PDI) e ubiquitina. A incubação de macrófagos de peritônio de camundongo com alb-AGE, ao longo do tempo, promoveu aumento na expressão das chaperonas Grp78 e Grp94, em comparação à alb-C. Outras proteínas da UPR também mostraram-se elevadas, ao longo do tempo, em condições glicoxidativas, como a elf2α o ATF6 e a CHOP. A expressão da ubiquitina foi aumentada com a exposição dos macrófagos à alb-AGE ou alb-DM, indicando ativação do sistema proteasomal. No entanto, a inibição do proteasoma com MG132 e a inibição de proteases de superfície (calpaína) não recuperaram a expressão do ABCA-1 em macrófagos tratados com alb-AGE. Em contrapartida, a inibição farmacológica do estresse do RE preveniu a redução do conteúdo de ABCA-1 em macrófagos glicoxidados. Nas incubações com alb-DM não foram observadas alterações na expressão da Grp78; no entanto, observou-se aumento na expressão da PDI, proteína envolvida na interface entre desbalanço redóx celular e estresse do RE. Este efeito não foi evidenciado na presença da alb-AGE. (AU)