Elementos de regulação e MicroRNAs envolvidos na modulação dos níveis de Hemoglobina Fetal em portadores de beta-hemoglobinopatias

Resumo

Os valores de normalidade para a Hemoglobina Fetal (Hb F) em indivíduos adultos e sem alterações de hemoglobinas variam de 0% a 1%. Entretanto, polimorfismos em determinadas regiões do genoma são conhecidos por influenciar a concentração dessa hemoglobina. Achados da literatura apontaram a participação de micro-RNAs na eritropoese, e estudos recentes sugerem que esses elementos parecem estar relacionados ao processo de troca de expressão que ocorre entre a Hb F e a Hb A. Esse processo tem importância no desenvolvimento da fisiopatologia da anemia falciforme e talassemia beta homozigota. Indivíduos portadores dessas afecções genéticas apresentam fenótipo e níveis de Hb F variáveis. Estima-se que os elementos de regulação e os micro-RNAs envolvidos no controle da expressão dos genes da ³-globina estejam diferentemente expressos em indivíduos que apresentam alterações de hemoglobinas em relação ao grupo controle negativo, constituído por indivíduos com Hb AA, e positivo, composto por indivíduos heterozigotos para mutações de Persistência Hereditária de Hemoglobina Fetal. Os objetivos desse estudo consistem em rastrear elementos de regulação e micro-RNAs que influenciam a expressão dos genes ³G e ³A em indivíduos portadores de anemia falciforme, beta talassemia homozigota e em grupo controle negativo e positivo em relação aos níveis aumentados de Hb F. As amostras de sangue periférico serão submetidas aos testes clássicos de diagnóstico de hemoglobinopatias, análise cromatográfica por HPLC e análise molecular para confirmação das mutações. Inicialmente será realizado um projeto piloto com amostras de indivíduos portadores de beta-hemoglobinopatias e indivíduos do grupo controle. O grupo amostral será submetido a rastreamento de elementos de regulação e micro-RNAs selecionados previamente por meio de ferramenta de bioinformática. A expressão dos micro-RNAs será analisada por meio de qPCR e RT-PCR. Os resultados dos elementos expressos nesse teste piloto serão aplicados aos portadores das beta-hemoglobinopatias submetidos a tratamento específico, com finalidade de avaliar a resposta ao uso de fármacos.