Estudo da frequência relativa e participação de subpopulações de células-tronco de câncer no processo de metástase em carcinoma epidermóide de boca

Resumo

O carcinoma epidermóide de boca (CEB) é uma das neoplasias malignas mais comuns da região da cabeça e do pescoço e ainda resulta em grande morbidade e mortalidade anualmente, sendo a presença de metástase em linfonodos cervicais o fator prognóstico mais significante. Nesse sentido, estudos têm associado os mecanismos de progressão, recorrência tumoral e metástase com a presença e persistência de células-tronco de câncer (CSC, do inglês cancer stem cell), assim como a ativação do programa de transição epitélio-mesenquimal (EMT, do inglês epithelial-mesenchymal transition). Ainda, evidências recentes mostram que há uma ligação entre as CSC e o processo de EMT, de forma que as CSC correspondem à subpopulação celular mais migratória e com maior potencial metastático comparado com as demais subpopulações de células tumorais. Portanto, o objetivo deste estudo é contribuir para a compreensão do comportamento biológico das células epiteliais tumorais capazes de invadir o tecido conjuntivo subjacente, atingir a circulação sanguínea e linfática e gerar metástases, na busca de possíveis marcadores biológicos de invasividade tumoral em CEB, com perspectiva de aplicação clínica. Para este fim, os níveis de expressão gênica e de proteínas relacionadas com os fenótipos de CSC (CD44, P75NGFR, BMI-1 e ALDH-1) e EMT (vimetina, SNAIL, AXL, E/N-caderina e TWIST1) serão avaliados por meio de qPCR, de forma comparativa, na linhagem de câncer de boca SCC-9, linhagem metastática correspondente SCC-9 LN1, gerada após indução da tumorigênese in vivo, bem como em células epiteliais de palato humano (CEPH) obtidos por meio de cultura primária. Os níveis de expressão protéica de alguns marcadores de CSC e EMT selecionados serão posteriormente avaliados por meio de imunofluorescência. Adicionalmente, as linhagens SCC-9 e SCC-9 LN1 serão analisadas em relação à capacidade de formação de colônias e esferas tumorais, como parte da avaliação da presença e proporção de células com propriedades de CSC dentre a população total. Acredita-se que ao final do estudo as moléculas estudadas contribuam para o esclarecimento sobre os mecanismos que regulam a metástase do CEB e possam fornecer novos alvos terapêuticos para inibição da invasão tumoral.