Estudo da alfa-sinucleína nas MAMs: o papel da mortalina e da transglutaminase 2 em condições estressantes induzidas pela alpha-sinucleína mutante.

Resumo

A principal característica patológica da Doença de Parkinson (DP) é a presença de agregados formados pela proteína alfa-sinucleína, chamados de Corpos de Lewy. Duas mutações no gene da alfa-sinucleína (SNCA) levam à formação de proteínas mutantes, a A30P e A53T, ambas relacionadas a casos de Doença de Parkinson familiar. De acordo com muitas evidências, a alfa-sinucleína se liga ao complexo I mitocondrial, promovendo a diminuição do ”qm, liberação de Ca2+ e de fatores pró-apoptóticos contidos no espaço inter-membranas das mitocôndrias. No entanto, trabalhos demonstram uma nova localização cellular da alfa-sinucleína em uma região denominada MAMs (mitochondria-associated ER membranes) que é um sub-domínio do retículo endoplasmático que interage com as mitocôndrias. Nas MAMs a ±-sinucleína pode interagir com muitas proteínas, receptores e canais de Ca2+, mortalina, TG2, IP3R3 e VDAC. O objetivo deste trabalho é caracterizar funcionalmente a interação entre estas proteínas e a alfa-sinucleína ou suas mutantes, por análises de western blot e imunoprecipitação, siRNA ou células knock-out. Outros aspectos relacionados com a sinalização e homeostase do Ca2+, assim como a dinâmica mitocondrial e a mitofagia também serão avaliadas usando métodos fluorescentes. O entendimento das interações da alfa-sinucleína com a TG2 e a mortalina e o seu papel na DP podem esclarecer os mecanismos pelos quais esta proteína promove disfunções celulares, que podem levar à morte neuronal na DP.