Caracterização da isoforma solúvel da proteína FAS (CD95) na resistência à cisplatina e à apoptose em células de câncer de pulmão utilizando a tecnologia CRISPR

Resumo

O câncer de pulmão aflige milhões de pessoas ao redor do mundo nos últimos anos, e possui um caráter extremamente agressivo, sendo, dentre os tipos de câncer, o mais letal. A proteína FAS é um sinalizador de apoptose que tem sido correlacionada à resistência quimioterápica no câncer de pulmão. O objetivo deste estudo é desenvolver um knockout específico da isoforma solúvel da proteína FAS usando a tecnologia CRISPR/Cas9 e avaliar o desenvolvimento da resistência ao quimioterápico cisplatina em células de câncer de pulmão. Serão utilizadas células de câncer de pulmão A549, tratadas ou não com cisplatina com uma dose que gera resistência ao fármaco. Posteriormente serão avaliados parâmetros celulares relacionados ao câncer, como a viabilidade celular, proliferação e vias celulares associadas a apoptose através de Western blotting. Espera-se obter uma linhagem celular de A549 modificada através de CRISPR/Cas9 que não expresse significativamente a isoforma solúvel de FAS e que tenha uma maior sensibilidade ao tratamento quimioterápico com cisplatina. (AU)