Novas terapias para infarto do miocárdio: papel do treinamento físico e novos RNAs

Resumo

O treinamento físico (TF) aeróbio é conhecido pela sua capacidade de atenuar os feitos deletérios do infarto do miocárdio (IM) e da insuficiência cardíaca bem como aumentar a sobrevida de pacientes cardiopatas. Sendo assim, muitos mecanismos participam desse processo, entretanto, existe uma grande lacuna na literatura sobre a participação dos RNAs circulares nessas repostas. RNAs endógenos competitivos (ceRNAs) são transcritos naturais que atuam como esponjas (diminuem a expressão) endógenas de miRNAs, modulando a ação desses sobre mRNAs-alvo. Os circRNAs são uma dentre as várias classes de ceRNAs. CircRNAs são formados a partir de um processo chamado backsplicing, que é a formação de um loop contínuo covalentemente fechado. Muitos circRNAs controlam a estabilidade e atividade de microRNAs, regulam a transcrição ou splicing alternativo, modificam a tradução de genes hospedeiros, ou ainda eles podem até ser traduzidos em proteínas1. Estes são expressos em vários tipos de células, e têm uma grande capacidade de regular a expressão gênica, principalmente ligando-se e inibindo microRNAs, funcionando como esponjas de microRNAs. Nós demonstramos que o TF atenua a disfunção cardíaca em ratos infartados regulando microRNAs2,3. No entretanto, pela ação do TF, não existem dados na literatura mostrando a ação de circRNAs atuando como esponja de microRNAs modulando sua ação sobre mRNAs-alvos, embora vários estudos mostram o seu papel crucial no desenvolvimento e fisiologia cardíaca4. A expressão anormal de circRNAs foi associada com doenças cardiovasculares tais como, insuficiência cardíaca, IM e aterosclerose, indicando a importância potencial dos circRNAs nestas condições patológicas. Porém, ainda é desconhecido se o TF modula os circRNAs descompensados no IM, promovendo atenuação da progressão da doença, prevenindo a insuficiência cardíaca. Diante dos resultados do nosso laboratório e do exposto, investigaremos o papel do TF aeróbio na modulação dos circRNAs atenuando o IM em ratos Wistar. Especificamente, por análise de larga escala (sequenciamento de RNAm, circRNAs e microRNAs) será traçada uma rede regulatória circRNA-microRNA-mRNA expressa no coração de animais sedentários (SED), treinados (TR), infartados (I) e infartados treinados (ITR). Posteriormente, serão identificados aqueles circRNAs modulados no IM e que são alterados pelo TF aeróbio (ITR), em especial buscando os que são normalizados para o padrão de expressão dos grupos SED ou TR. Por uma pesada análise de bioinformática serão identificados os microRNAs alvos do circRNAs, genes regulados e as vias de sinalização envolvidas. Para estudo in vitro (em cultura de cardiomiócitos tratada com Isoproterenol) e in vivo (em animais infartados) serão selecionados 1 ou 2 circRNAs modulados pelo TF para validação de seus efeitos benéficos frente a estímulo patológico. Para isso, serão contruídos vetores virais com rAAV9-MHC-circRNA para aumentar a expressão do circRNA selecionado ou inibido com RNAi para analisarmos se este(s) previnem disfunção e alterações morfológicas em cardiomiócitos isolados e no IM. Buscando aplicação translacional, por análises de bioinformática buscaremos se os circRNAs encontrados apresentam associação com a sobrevida de deferentes coorte de pacientes com IM. (AU)