Splicing alternativo em transcritos de HSP como um mecanismo de adaptação celular em Trichophyton rubrum

• Processo: 19/21888-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Nilce Maria Martinez-Rossi
• Beneficiário: Nilce Maria Martinez-Rossi
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/03847-7 - Caracterização molecular de mecanismos envolvidos na patogenicidade e sinalização celular em fungos, AP.TEM
• Assunto(s): Trichophyton rubrum Proteínas de choque térmico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cell adaptation | dermatophytes | Heat Shock Proteins | stress response | Trichophyton rubrum | Genética Molecular de fungos

Resumo

As proteínas de choque térmico (HSPs) estão envolvidas em processos críticos como invasão do tecido hospedeiro, resistência e patogenicidade em dermatófitos. A análise de RNA-Seq do Trichophyton rubrum exposto ao ácido undecanóico (UDA) revelou eventos de retenção de íntrons nos transcritos de HSP. Como os HSPs são modulados em resposta a vários estímulos e como o processamento alternativo (EA) pode resultar em uma ampla diversidade no proteoma das células eucarióticas, nosso objetivo foi confirmar os eventos de retenção mencionados, investigando suas conseqüências e extensão. Além disso, buscamos determinar: (1) o perfil de expressão dos genes HSP em um cenário de infecção e (2) a importância da Hsp90 para o potencial queratinolítico de T. rubrum. As análises de RT e qPCR comparando a exposição a UDA e terbinafina (TRB) confirmaram a presença de duas isoformas de mRNA do gene tipo hsp7, com padrões de expressão distintos em resposta a UDA e TRB. O perfil de expressão do HSP revelou dois transcritos com regulação positiva, três com regulação negativa e quatro sem modulação; A inibição da Hsp90 pela 17-AAG resultou em uma diminuição significativa no potencial queratinolítico a 37 ° C. No total, esses resultados ampliam o conhecimento atual sobre a importância das vias mediadas pelo HSP para a adaptação celular e outros aspectos da biologia dos dermatófitos, indicando que as proteínas da rede HSP podem ser alvos potenciais para a terapia antifúngica. (AU)