Efeito do butirato sobre a funcao de neutrofilos e resposta inflamatoria

• Processo: 09/51163-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Rui Curi
• Beneficiário: Rui Curi
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Auxílio(s) vinculado(s): 10/52591-4 - Efeitos dos ácidos graxos trans e ácido linoléico conjugado (CLA) sobre o metabolismo de carboidratos e lipídeos e marcadores inflamatórios em ratos deficientes em ácidos graxos, AP.R
• Assunto(s): Tributirina Citocinas Sepse Inflamação Neutrófilos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Butirato | Citocinas | Inflamacao | Neutrofilos | Sepse | Tributirina

Resumo

Neste trabalho analisaremos o efeito do butirato sobre a produção de citocinas e óxido nítrico por neutrófilos in vitro e os mecanismos envolvidos: regulação da expressão de genes (iNOS e citocinas), atividade de histona desacetilase (HDAC) e do fator de transcrição NFKB. Além disso, avaliaremos o efeito da tributirina (Tb), pró-droga de butirato, sobre o processo inflamatório induzido por glicogênio de ostra em ratos e em modelo murino de endotoxemia. Os experimentos in vitro serão relizados com neutrófilos obtidos de ratos quatro horas após administração i.p. de glicogênio de ostra a 1%. A produção de citocinas (TNF-α, IL-1ß, CINC-2 e IL-10) será avaliada por ELISA e a de NO pelo método de Griess. A expressão gênica de iNOS e citocinas será avaliada por PCR em tempo real. A ativação do NFKB será avaliada pelo ensaio de mobilidade eletroforética retardada (EMSA). A atividade da HDAC será avaliada utilizando Kit da Cayman. Ratos Wistar machos adultos serão tratados com Tb (0,5, 1,0 e 3,0g/Kg de peso corpóreo). Após 1 hora do tratamento, os animais serão inoculados i.p. com glicogênio de ostra. Quatro horas após, procederemos à coleta e, posterior, contagem das células que migraram para o peritônio. As células obtidas serão avaliadas quanto à capacidade de produzir citocinas e NO em resposta ao LPS (5μg/mL). Camundongos BALB/c machos adultos serão tratados com Tb 0,3 e 1g/kg de peso a cada 12 horas durante 3 dias. Após 1 hora do último tratamento, os animais serão inoculados com LPS 5μg/kg e sacrificados após 1 e 24 horas. Serão realizados hemograma, mielograma, esplenograma e determinação das concentrações plasmáticas das citocinas. (AU)