Atypical enteropathogenic Escherichia coli that contains functional locus of enterocyte effacement genes can be attaching-and-effacing negative in cultured epithelial cells

• Processo: 11/10592-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Waldir Pereira Elias Junior
• Beneficiário: Waldir Pereira Elias Junior
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 04/12136-5 - Escherichia coli enteropatogênica atípica (EPEC atípica), AP.TEM
• Assunto(s): Escherichia coli enteropatogênica Adesão Patogenicidade bacteriana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: adesão | E | Epec | Escherichia coli enteropatogênica | Lesão A | Patogenicidade bacteriana | Patogenicidade Bacteriana

Resumo

Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) provoca uma lesão característica no enterócitos denominada lesão attaching-and-effacing (A/E), a qual é provocada por proteínas codificadas em genes localizados no locus of enterocyte effacement (LEE). EPEC é classificada com típica (tEPEC) e atípica (aEPEC), classificação baseada na presença ou ausência do plasmídio EPEC adherence factor, respectivamente. Neste trabalho nós analisamos as regiões LEE de três amostras de aEPEC que aderem em cultura de células HEp-2, nos padrões localizado-like (ALL), agregativo (AA) e difuso (AD), bem como uma amostra não aderente (NA). As adesões características e a capacidade de induzir a lesão A/E foram investigadas em cultura de células HeLa, Caco-2, T84 e HT29. Os resultados dos padrões de adesão e do teste de fluorescent actin staining (FAS) foram reprodutíveis em todas as linhagens celulares. A região LEE estava estruturalmente intacta e funcional em todas as amostras, independentemente da capacidade de causar a lesão A/E. O plasmídio pKC471, que expressa EspFu, foi introduzido em todas as amostras, demonstrando que esta proteína não influencia nos padrões de adesão ou capacidade de causar a lesão A/E, nas amostras aderentes. Entretanto, a amostra NA albergando o plasmídio pKC471 foi capaz de aderir no padrão ALL e induzir lesão A/E cultura de células HeLa. Nossos dados indicam que amostras de aEPEC FAS-negativas são potencialmente capazes de induzir a lesão A/E in vivo, enfatizando a preocupação com este teste para a determinação da virulência de aEPEC. Além disso, a presença de EspFu foi suficiente para proporcionar um fenótipo de adesão e uma amostra de aEPEC não aderente, através de uma ativação direta ou indireta dos operons LEE4 e LEE5. (AU)