Remoção de endotoxina presente em meio fermentado contendo biomoléculas utilizando sistemas micelares de duas fases aquosas

• Processo: 05/60159-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Adalberto Pessoa Junior
• Beneficiário: André Moreni Lopes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Extração líquido-líquido Biotecnologia Biosseparação Escherichia coli Moléculas bioativas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biomoleculas | Biosseparacao | Biotecnologia | E. Coli Recombinante | Extracao Liquido-Liquido

Resumo

Em indústria biotecnológica é freqüente a utilização de bactérias como hospedeiros para obtenção de proteínas recombinantes de interesse farmacêutico. Assim, faz-se necessária a remoção de endotoxinas das preparações resultantes sem a desnaturação protéica. O projeto visa o estudo da utilização de sistemas micelares de duas fases aquosas para remoção de endotoxinas de preparações contendo proteínas. Esse sistema proporciona uma ambiente favorável às biomoléculas e possibilidade de remoção das endotoxinas, que são moléculas lipopolissacarídicas com caráter anfifílico semelhantemente aos tensoativos. Será estudada a partição de endotoxina, obtida de cultivo de cepa recombinante de Escherichia coli DH5-a, em sistema micelar constituído pelo tensoativo Triton X-114. Será estudada a influência do efeito de volume de exclusão e da formação de domínios de uma fase na outra na partição da endotoxina. Os ensaios de partição serão realizados inicialmente com a endotoxina pura e, em seqüência, na presença da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv), a qual vem sendo estudada como potencial indicador biológico e é produzida por E. coli DH5-ã Para a realização deste estudo, será necessária a implementação de técnica no laboratório de quantificação de endotoxinas. Além disto, a influência da endotoxina na curva binodal do sistema micelar, bem como a influência do tensoativo na metodologia de determinação de endotoxina, serão avaliadas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LOPES, ANDRE MORENI; ROMEU, JORGE SANCHEZ; MEIRELES, ROLANDO PAEZ; PERERA, GABRIEL MARQUEZ; MORALES, ROLANDO PERDOMO; PESSOA, ADALBERTO, JR.; CARDENAS, LOURDES ZUMALACARREGUI. Adsorption of endotoxins on Ca2+-iminodiacetic acid by metal ion affinity chromatography. CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY, v. 30, n. 11, p. 9-pg., 2012-11-01. (05/60159-7)

LOPES, ANDRE MORENI; DUTRA MOLINO, JOAO VITOR; DOS SANTOS-EBINUMA, VALERIA CARVALHO; PESSOA, JR., ADALBERTO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. Effect of electrolytes as adjuvants in GFP and LPS partitioning on aqueous two-phase systems: 1. Polymer-polymer systems. Separation and Purification Technology, v. 206, p. 39-49, NOV 29 2018. (05/60159-7, 14/16424-7, 14/19793-3, 07/51978-0)

RODRIGUES TEIXEIRA-PINTO, RENATA GARCIA; MOLINO, JOAO VITOR DUTRA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA CARVALHO; PESSOA, JR., ADALBERTO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO; LOPES, ANDRE MORENI. Effect of electrolytes as adjuvants in GFP and LPS partitioning on aqueous two-phase systems: 2. Nonionic micellar systems. Separation and Purification Technology, v. 210, p. 69-79, FEB 8 2019. (07/51978-0, 14/19793-3, 05/60159-7)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

LOPES, André Moreni. Remoção de endotoxina presente em meio fermentado contendo biomoléculas utilizando sistemas micelares de duas fases aquosas. 2010. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.