Bases moleculares da diferenciação "in vitro" de células T a partir de células CD34+ isoladas de sangue de cordão umbilical

• Processo: 09/08872-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Marco Antonio Zago
• Beneficiário: Lucila Habib Bourguignon Oliveira
• Instituição Sede: Hemocentro de Ribeirão Preto. Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da USP (HCMRP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Hematologia Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Expressão gênica Linfócitos T MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células progenitoras hematopoéticas | Células T | expressão gênica | microarray | microRNA | sangue de cordão umbilical | Hematologia

Resumo

O desenvolvimento dos linfócitos T requer um microambiente específico do timo, no qual células progenitoras hematopoéticas (CPH) recebem sinais que ativam a via Notch. Após a interação ligante-receptor, o domínio intracelular de Notch é translocado até o núcleo onde atua como fator de transcrição (FT), culminando na ativação de genes alvos. Em uma etapa pós-transcricional os microRNA (miRNA) atuam ligado-se nos transcritos alvos de RNA mensageiro (RNAm), induzindo sua degradação ou inibindo a tradução. Apesar da crescente atenção aos miRNA nos processos de diferenciação hematopoética, o conjunto de miRNA com papéis específicos no início do comprometimento das CPH com a linhagem linfóide T, permanecem desconhecidos. Assim, com o objetivo de compreender o circuito molecular responsável pelo controle dos estágios iniciais da diferenciação dos linfócitos T, utilizaremos CPH CD34+ obtidas de sangue de cordão umbilical (SCU) e um sistema de diferenciação in vitro, baseado em células estromais expressando o ligante DL1 de Notch (OP9-DL1). A expressão dos transcritos de RNAm e de microRNA será avaliada nas CPH, antes e após a ativação da via Notch, utilizando microarrays capazes de quantificar a expressão do conjunto total de transcritos de RNAm do genoma humano, assim como dos microRNAs descritos. Esses resultados poderão contribuir substancialmente para o entendimento do circuito molecular que regula os primeiros passos do processo de diferenciação dos linfócitos T.