Efeito da administração aguda de iodo sobre a expressão e a atividade do promotor do gene da pendrina: estudo in vivo e in vitro

• Processo: 10/05503-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Maria Tereza Nunes
• Beneficiário: Jamile Calil Silveira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 12/13011-8 - O iodeto regula a expressão e atividade do seu transportador apical pendrina? Estudo em células PCCl3 e TSA-201, BE.EP.DR
• Assunto(s): Iodo Glândula tireoide Fisiologia endócrina Expressão gênica Pendrina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | iodo | pendrina | Tireóide | Fisiologia Endócrina

Resumo

Pendrina é uma proteína transportadora de ânions, codificada pelo gene PDS. Ela é expressa em vários tecidos, bem como na tiróide, onde está inserida na membrana apical de células foliculares. Estudos demonstraram que a pendrina pode mediar o efluxo apical do iodeto dos tirócitos para o lúmen folicular. Sabendo-se que o iodo é fundamental para a síntese de hormônios tiroidianos e considerando-se que a expressão de alguns mRNAs que codificam proteínas envolvidas com o transporte de oligominerais é modificada por alterações no aporte dos mesmos, é objetivo deste trabalho avaliar, por meio de estudos in vivo e in vitro, o efeito da administração aguda de iodo na expressão do mRNA e proteína pendrina em curtos períodos de tempo (30 min à 24 h), bem como analisar o efeito desse tratamento na atividade da região promotora do gene PDS. Serão utilizados ratos machos Wistar (~200 g), divididos nos grupos: controle e iodo, os quais receberão injeção ip de salina (0,9% NaCl) ou NaI (2 mg de NaI em 0,5 ml de salina), respectivamente, sendo decapitados após 30', 1 e 24 h da administração do iodo/salina. O RNA total da tiróide será extraído para a análise da expressão e grau de poliadenilação do mRNA da Pendrina por Real Time PCR. Para o estudo in vitro será utilizada a linhagem celular de tiróide normal de rato PCCl3, que ao atingir 70% de confluência, será tratada ou não com 10-3 M de NaI. O experimento será realizado em triplicata; as células permanecerão sob tratamento por 30 min, 1 h, e 24 h, e, após esses períodos de tempo, serão removidas e o RNA extraído para análise da expressão do mRNA da Pendrina por Real Time PCR. Para a análise da atividade do promotor de PDS, este será inserido no vetor pGL3-básico, que contém o gene da luciferase, cuja atividade servirá como indicador da atividade deste promotor nas condições de tratamento estudadas.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVEIRA, JAMILE C.; KOPP, PETER A.. Pendrin and anoctamin as mediators of apical iodide efflux in thyroid cells. CURRENT OPINION IN ENDOCRINOLOGY DIABETES AND OBESITY, v. 22, n. 5, p. 374-380, OCT 2015. (10/05503-2)

SERRANO-NASCIMENTO, CAROLINE; CALIL-SILVEIRA, JAMILE; GOULART-SILVA, FRANCEMILSON; NUNES, MARIA TEREZA. New insights about the posttranscriptional mechanisms triggered by iodide excess on sodium/iodide symporter (NIS) expression in PCCl3 cells. Molecular and Cellular Endocrinology, v. 349, n. 2, p. 154-161, FEB 26 2012. (08/56446-9, 10/05503-2, 09/17834-6, 09/50175-6)

CALIL-SILVEIRA, JAMILE; SERRANO-NASCIMENTO, CAROLINE; KOPP, PETER ANDREAS; NUNES, MARIA TEREZA. Iodide excess regulates its own efflux: a possible involvement of pendrin. AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY, v. 310, n. 7, p. C576-C582, APR 1 2016. (12/24391-6, 10/05503-2, 09/17834-6, 12/13011-8)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SILVEIRA, Jamile Calil. Efeito da administração aguda de iodo na expressão gênica e atividade do promotor da pendrina: estudos em ratos e em células PCCI3.. 2014. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.