Análise das vias da "unfolded protein response" (upr) na regulação da expressão do glut4 em células musculares tratadas com palmitato.

• Processo: 10/09984-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Ubiratan Fabres Machado
• Beneficiário: Patrícia Ebersbach Silva
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Células musculares Transportador de glucose tipo 4 Resistência à insulina Fisiologia endócrina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células musculares | Glut4 | Palmitato | resistência a insulina | Unfolded Protein Response | Fisiologia endócrina

Resumo

O excesso de ácidos graxos saturados tem sido relatado como uma condição que predispõe à inflamação crônica e estresse oxidativo, eventos estes que tem papel crucial no desencadeamento da resistência a insulina (RI) e do diabetes Mellitus do tipo 2 (DMT2). Essa resposta inflamatória aumentada pode causar uma perturbação no lúmem do retículo endoplasmático (RE) gerando o estresse de RE. Este estresse do RE resulta na ativação de vias celulares que compreendem uma resposta celular conhecida como Unfolded Protein Response (UPR). Estudos atuais têm demonstrado uma ativação do fator de transcrição NF-kB por meio das vias da UPR. Sabe-se que o NF-kB atua na transcrição de citocinas pró-inflamatórias, que por sua vez, estão relacionadas a prejuízos na via de sinalização insulínica e diminuição da translocação dos transportadores de glicose GLUT4. Além disso, o próprio NF-kB tem efeito negativo sobre a expressão do transportador de glicose GLUT4, diminuindo sua transcrição. Embora a participação das respostas ao estresse de RE na geração de resistência a insulina estejam bem estabelecidas, ainda pouco se sabe a respeito da importância de cada via específica sobre a expressão da proteína transportadora de glicose GLUT4. Dentro deste contexto, o presente projeto tem como objetivo investigar o mecanismo pelo qual a UPR regula a ativação do NF-kB e conseqüentemente a expressão do GLUT4 em células musculares da linhagem L6 tratadas com ácido palmítico. Para isto, serão realizadas curvas tempo-resposta e dose-resposta onde as células L6 serão tratadas com palmitato e a expressão da proteína GLUT4 será analisada. Posteriormente as células musculares serão submetidas a outros tratamentos com drogas inibidoras das vias da UPR (Salubrinal) e drogas que atuam sobre NF-kB (Cardamonin). Por fim, será realizado a imunoprecipitação dos fatores de transcrição ligados a cromatina (NF-kB p50) para identificar seqüências específicas de DNA, que estão ligadas à proteína GLUT4.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

EBERSBACH-SILVA, PATRICIA; POLETTO, ANA CLAUDIA; DAVID-SILVA, ALINE; SERAPHIM, PATRICIA MONTEIRO; ANHE, GABRIEL FORATO; PASSARELLI, MARISA; FURUYA, DANIELA TOMIE; MACHADO, UBIRATAN FABRES. Palmitate-induced Slc2a4/GLUT4 downregulation in L6 muscle cells: evidence of inflammatory and endoplasmic reticulum stress involvement. LIPIDS IN HEALTH AND DISEASE, v. 17, APR 2 2018. (10/09984-5, 13/18841-1)

SILVA, PATRICIA EBERSBACH; POLETTO, ANA CLAUDIA; DOS SANTOS FERREIRA MARQUES, MILANO FELIPE; OKAMOTO, MARISTELA MITIKO; ANHE, GABRIEL FORATO; MACHADO, UBIRATAN FABRES. Palmitate-Induced Perk Phosphorylation Precedes the Reduction in Glut4 Expression in L6 Myotubes. Diabetes, v. 60, p. 1-pg., 2011-07-01. (10/09984-5)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SILVA, Patrícia Ebersbach. Redução da expressão do GLUT4 induzida por palmitato não envolve estresse de retículo endoplasmático em células musculares L6.. 2013. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.