Análise da expressão de genes regulados pela proteína dermicidina nas células do melanoma maligno g-361 pelo método de dna-microarray

• Processo: 12/02497-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: José Ernesto Belizario
• Beneficiário: Nancy Marcela Pérez Sosa
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Oncologia Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dermicidina | Expressão de genes | microarray | Oncologia

Resumo

A proteína dermicidina (DCD) é codificada por um gene localizado na porção 12q13.1 do cromossomo 12, presente apenas em primatas e humanos. A proteína é secretada por células de glândulas exócrinas da pele, melanócitos, neurônios e células epiteliais da mama normal. Alguns estudos mostraram a importância da proteína DCD em processos oncogênicos nos carcinomas de mama, próstata e melanoma, revelados por seu papel como um fator de crescimento e sobrevivência celular. Nos estudos realizados no nosso laboratório mostramos que a DCD é expressa em células normais da pele, placenta, cérebro e em vários tumores, incluindo os carcinomas de mama e melanoma maligno. Ensaios biológicos e bioquímicos mostraram que o "knockdown" na expressão de DCD no melanoma maligno G-361 via RNA de interferência (RNAi) diminuiu significativamente o crescimento in vitro em cultura celular e a formação de tumores em camundongos Nude. Resultados similares foram obtidos quando camundongos Nude transplantados com células de melanoma G-361 foram tratados com anticorpos policlonais de coelhos contra a proteína DCD, administrados uma vez por semana por 5 semanas. No presente projeto pretende-se identificar os genes diferencialmente expressos em células do melanoma maligno G-361 controle e células expressando RNAi para a DCD analisando a expressão gênica global pela tecnologia de microarranjo de DNA (GeneChip Human 1.0 ST array). Os genes diferencialmente expressos (> 3-vezes) entre os grupos controle e expressando RNAi serão validados por ensaios de expressão por PCR em tempo real, imuno-histoquímica, Western-blot e imunofluorescência indireta. Pretende-se também fazer avaliações funcionais de vias de sinalização intracelular de proliferação e resistência à morte celular. Espera-se mostrar com estes estudos que a proteína DCD atua como um oncogene promovendo a transcrição de genes envolvidos na transformação e progressão dos melanócitos normais a melanócitos malignos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BELIZARIO, JOSE E.. Cancer Risks Linked to the Bad Luck Hypothesis and Epigenomic Mutational Signatures. EPIGENOMES, v. 2, n. 3, SEP 2018. (12/02497-7, 14/20847-0)

BELIZARIO, JOSE E.; SANGIULIANO, BEATRIZ A.; VIANA-SANTOS, BEATRIZ; PEREZ-SOSA, MARCELA; CALDEIRA, IZABELA. Microscopes and technologies for imaging cells and their protein networks: From nano to atomic scale resolution. TECHNOLOGY, v. 5, n. 2, p. 61-73, JUN 2017. (07/59800-5, 12/02497-7, 05/56909-0)

BELIZARIO, JOSE E.; SIRCILI, MARCELO P.. Novel biotechnological approaches for monitoring and immunization against resistant to antibiotics Escherichia coli and other pathogenic bacteria. BMC Veterinary Research, v. 16, n. 1, NOV 2 2020. (12/02497-7, 14/20847-0, 10/06707-0, 08/05519-6)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SOSA, Nancy Marcela Pérez. Análise da expressão de genes regulados pela proteína Dermicidina nas células do melanoma maligno G-361 pelo método de DNA-microarray. 2014. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM/SBD) São Paulo.