Exploração genética sobre os mecanismos de regulação do Sistema de Secreção do Tipo IV em Xanthomonas citri e como esse sistema medeia a morte contato-dependente

• Processo: 15/18237-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Shaker Chuck Farah
• Beneficiário: William Cenens
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/17303-7 - Estrutura e função de sistemas de secreção bacterianas, AP.TEM
• Assunto(s): Bioquímica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Genome-wide screening | Interbacterial competition | Plant pathogen Xanthomonas citri | Single-cell fluorescence microscopy | Type IV secretion systems | Bioquímica

Resumo

Durante a morte de bactérias vizinhas induzida pelo Sistema de Secreção do Tipo IV (T4SS) por Xanthomonas citri (Xac), diversas proteínas efetoras são secretadas e injetadas nas células alvo por um mecanismo contato-dependente. O primeiro objetivo deste projeto será investigar a função dessas proteínas efetoras. A avaliação da atividade de deleção de diferentes mutantes efetores em bactérias de diferentes espécies permitirá a discriminação entre efeitos antibacterianos e reguladores de proteínas efetoras distintas. Além disso, a expressão ectópica e condicional de proteínas efetoras combinada com estudos em interação proteica irão indicar seus alvos celulares. O segundo objetivo deste projeto envolve estratégias de inserção de transposon no genoma completo (whole-genome transposon insertion strategies) para identificar todos os loci envolvidos durante a competição de Xac com outras espécies de bactérias. A utilização de "straightforward classical transposon screen" irá revelar mutantes em vias regulatórios, toxinas (além de componentes estruturais do T4SS) e esta busca será expandida por uma técnica de Tn-seq, aumentando drasticamente o conhecimento genético na competição interbacteriana de Xac. Ademais, este objetivo pode revelar mecanismos alternativos que podem funcionar independentemente ou conjuntamente com o T4SS durante a competição interbacteriana. Por fim, o ultimo objetivo deste projeto será a análise da regulação, organização e localização de T4SS durante a competição interbacteriana por meio da combinação de microscopia de fluorescência com resolução temporal com diferentes técnicas de marcação de fluorescência.

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BAYER-SANTOS, ETHEL; CENENS, WILLIAM; MATSUYAMA, BRUNO YASUI; OKA, GABRIEL UMAJI; DI SESSA, GIANCARLO; MININEL, IZABEL DEL VALLE; ALVES, TIAGO LUBIANA; FARAH, CHUCK SHAKER. The opportunistic pathogen Stenotrophomonas maltophilia utilizes a type IV secretion system for interbacterial killing. PLOS PATHOGENS, v. 15, n. 9, SEP 2019. (15/25381-2, 17/17303-7, 18/04553-8, 15/18237-2, 17/02178-2, 16/00458-5, 11/07777-5)

CENENS, WILLIAM; ANDRADE, MAXUEL O.; LLONTOP, EDGAR; ALVAREZ-MARTINEZ, CRISTINA E.; SGRO, GERMAN G.; FARAH, CHUCK S.. Bactericidal type IV secretion system homeostasis in Xanthomonas citri. PLOS PATHOGENS, v. 16, n. 5, MAY 2020. (19/12234-2, 15/18237-2, 14/04294-1, 17/17303-7, 11/07777-5)

OKA, GABRIEL U.; SOUZA, DIORGE P.; CENENS, WILLIAM; MATSUYAMA, BRUNO Y.; CARDOSO, MARCUS V. C.; OLIVEIRA, LUCIANA C.; LIMA, FILIPE DA SILVA; CUCCOVIA, IOLANDA M.; GUZZO, CRISTIANE R.; SALINAS, ROBERTO K.; et al. tructural basis for effector recognition by an antibacterial type IV secretion syste. PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, v. 119, n. 1, JAN 4 2022. (18/09277-9, 15/18237-2, 17/17303-7, 16/00458-5)

LLONTOP, EDGAR E.; CENENS, WILLIAM; FAVARO, DENIZE C.; SGRO, GERMAN G.; SALINAS, ROBERTO K.; GUZZO, CRISTIANE R.; FARAH, CHUCK S.. he PilB-PilZ-FimX regulatory complex of the Type IV pilus from Xanthomonas citr. PLOS PATHOGENS, v. 17, n. 8, AUG 2021. (15/18237-2, 19/12234-2, 17/17303-7)