Estudo da via Hippo em meduloblastoma: inibição de YAP e sua relação com células-tronco tumorais

• Processo: 15/26419-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Oswaldo Keith Okamoto
• Beneficiário: Lucas Carvalho Price
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia celular Sistema nervoso central Sobrevivência celular Células tumorais Células-tronco neoplásicas Expressão gênica Meduloblastoma Proliferação celular Transdução de sinais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células-tronco tumorais | Meduloblastoma | verteporfina | via Hippo | Yap | Biologia de células tumorais

Resumo

A via Hippo é uma via de sinalização celular que está recebendo cada vez mais atenção devido à trabalhos relacionando sua função com a regulação do tamanho dos órgãos e também ao desenvolvimento de diversos tipos de tumores. Ela é composta por uma cascata de fosforilações proteicas que culmina na inibição de dois fatores de transcrição, o YAP e o TAZ, que regulam a expressão de genes associados com proliferação e sobrevivência celular. Uma desregulação dessa via pode resultar no aumento da atividade de YAP e TAZ, causando um crescimento exagerado do órgão afetado que, se mantido, pode iniciar a formação de tumores. Além disso, existem evidências de uma maior expressão desses co-fatores em células-tronco normais e tumorais, relacionando a atividade dessas proteinas com o estado indiferenciado. No presente projeto, pretende-se estudar o possível envolvimento da proteina YAP no desenvolvimento de meduloblastoma, um tumor maligno embrionário do sistema nervoso central pouco estudado do ponto de vista de desregulação da via hippo, mas que é conhecido por apresentar células-tronco cancerosas em sua composição. Primeiramente, será avaliado o uso da verteporfina - uma molécula descrita por inibir a atividade de YAP em diferentes tipos celulares - na inibição de YAP em linhagens celulares distintos de meduloblastoma humano. O efeito da inibição será verificado pela expressão de genes alvo de YAP. Em seguida, será avaliado o efeito do tratamento com verteporfina sobre a auto-renovação de células-tronco de meduloblastoma por meio de ensaios de viabilidade e proliferação celular, capacidade de geração de neuroesferas (culturas enriquecidas em células-tronco tumorais) e expressão de marcadores de células-tronco tumorais. Esse estudo permitirá avaliar as consequências da inibição farmacológica de YAP sobre comportamento de células-tronco de meduloblastoma.