Desenvolvimento de queratinócitos da linhagem HaCaT nocautes para a enzima PKM2

• Processo: 16/10867-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: José Carlos Farias Alves Filho
• Beneficiário: Gabriel Azevedo Públio
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08216-2 - CPDI - Centro de Pesquisa em Doenças Inflamatórias, AP.CEPID
• Assunto(s): Autoimunidade Expressão gênica Enzimas Proliferação celular Linhagem celular Queratinócitos Psoríase CRISPR-Cas9
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: CRISPR-Cas9 | Pkm2 | Psoríase | queratinócitos | Autoimunidade

Resumo

Os queratinócitos são as células presentes na epiderme que exercem um papel central em respostas inflamatórias na pele, participando ativamente do desenvolvimento e manutenção de certas patologias, como a psoríase. Nos últimos anos, têm sido demostrado que células ativadas com estímulos inflamatórios sofrem uma reprogramação metabólica que culmina no aumento da expressão de genes envolvidos com a via glicolítica, um fenômeno conhecido como glicólise aeróbica ou efeito de Warburg. O fator de transcrição HIF-1± é essencial para o desenvolvimento do efeito Warburg, pois promove a transcrição de diversas enzimas da glicólise aeróbica, dentre elas a enzima Piruvato Kinase M2 (PKM2). A PKM2 apresenta duas conformações estruturais, tetramétrica ou dimérica, apresentando função de piruvato quinase e de co-fator transcricional de HIF-1±, respectivamente. Estudos recentes tem demonstrado que a PKM2 pode ser ativada por estímulos inflamatórios, sendo importante para a secreção de citocinas e proliferação celular. Neste sentido, resultados um projeto de doutorado em andamento em nosso laboratório demonstram que a PKM2 está altamente expressa na pele de pacientes e de animais com psoríase. No entanto, não há estudos na literatura sobre a participação da PKM2 na ativação de queratinócitos. Assim, o objetivo deste presente projeto de iniciação científica (IC) é gerar uma linhagem celular de queratinocitos (HaCat) nocaute para a enzima PKM2, a qual será posteriormente utilizada como ferramenta para investigações detalhadas da participação dessa enzima em ativação de queratinócitos e desenvolvimento e manutenção da psoríase.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

VERAS, FLAVIO P.; PUBLIO, GABRIEL A.; MELO, BRUNO M.; PRADO, DOUGLAS S.; NORBIATO, THAINA; CECILIO, NERRY T.; HIROKI, CARLOS; DAMASCENO, LUIS EDUARDO A.; JUNG, REBECCA; TOLLER-KAWAHISA, JULIANA E.; et al. Pyruvate kinase M2 mediates IL-17 signaling in keratinocytes driving psoriatic skin inflammation. CELL REPORTS, v. 41, n. 13, p. 23-pg., 2022-12-27. (13/08216-2, 16/10867-0)