Identificação do perfil metabólico das células com expressão ectópica de PVALB e investigação do mecanismo molecular associado sua expressão nos adenomas de células de Hürthle

• Processo: 17/06487-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Janete Maria Cerutti
• Beneficiário: Thais Biude Mendes
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Endocrinologia Neoplasias da glândula tireoide Adenoma Carcinoma Células oxífilas Expressão ectópica do gene
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Hürthle | Pvalb | Tiróide | Endocrinologia

Resumo

A partir da análise realizada pela técnica de SAGE (Serial Analysisof Gene Expression) realizada em amostras benignas e malignas da tiróide com posterior validação por PCR em tempo real e imunohistoquímica verificamos que a expressão combinada de cinco marcadores (PVALB, ITM1 e C10rf24, ARG2 e DDIT3), é capaz de distinguir as lesões benignas e malignas da tiróide com alta sensibilidade e especificidade. Entre estes, PVALB é especificamente expresso nos adenomas de células de Hürthle, desta forma, é um marcador de benignidade. Para compreender o papel de PVALB na patogênese dos tumores da tiróide, nosso grupo realizou estudos in vitro. Demonstramos, por meio da expressão ectópica de PVALB em linhagens celulares de carcinoma folicular da tiroide uso de indicadores específicos de Ca2+ livre Fluo-4, AM (citoplasma) e Rhod-2, AM (mitocôndria) e tratamento com tapsigargina, um inibidor seletivo da Ca2+-ATPase do retículo (SERCA), que PVALB reduz as taxas de Ca2+ livre no citoplasma e na mitocôndria. Além disso, verificamos que PVALB reduziu as taxas de proliferação celular e induziu a morte celular, provavelmente via diminuição da fosforilação de GSK-3² e AKT e expressão de proteínas associadas ao estresse de retículo (PERK). Além disso, por meio da análise das células por microscopia eletrônica de transmissão, observamos que as células que expressam PVALB apresentam uma alteração na morfologia celular. PVALB promoveu um aumento no tamanho celular e aumento no número das mitocôndrias. Por fim, observamos que a expressão de PVALB está correlacionada com a presença de cálcio nas amostras de ACH, confirmando nossos resultados obtidos in vitro. Estes dados em conjunto, sugerem um importante papel de PVALB na aquisição das características fenotípicas comumente observadas nas células de Hürthle e que PVALB pode atuar como um gene supressor tumoral. Neste projeto propomos investigar o mecanismo associado a alteração da expressão de PVALB nos tumores de células de Hürthle. Investigando se estas alterações se devem a algum mecanismo epigenético (metilação) ou por número de cópias. Propomos também analisar o perfil metabólico associado a expressão ectópica de PVALB nas linhagens celulares de carcinomas folicular da tiróide e, desta forma, identificar possíveis as vias metabólicas que possam contribuir na patogênese dos tumores da tiróide. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ARAUJO, ALINE NEVES; CAMACHO, CLEBER PINTO; MENDES, THAIS BIUDE; LINDSEY, SUSAN CHOW; MORAES, LAIS; MIYAZAWA, MARTA; DELCELO, ROSANA; PELLEGRINO, RENATA; MAZZOTTI, DIEGO ROBLES; MACIEL, RUI MONTEIRO DE BARROS; et al. Comprehensive Assessment of Copy Number Alterations Uncovers Recurrent AIFM3 and DLK1 Copy Gain in Medullary Thyroid Carcinoma. CANCERS, v. 13, n. 2, JAN 2021. (10/13833-2, 14/06570-6, 17/06487-0, 12/02248-7)

DE JESUS PANIZA, ANA CAROLINA; MENDES, THAIS BIUDE; BORGES VIANNA, MATHEUS DUARTE; DIAS THOMAZ, DEBORA MOTA; CHIAPPINI, PAULA B. O.; COLAZZA-GAMA, GABRIEL A.; LINDSEY, SUSAN CHOW; DE CARVALHO, MARCOS BRASILINO; FERREIRA ALVES, VENANCIO AVANCINI; CURIONI, OTAVIO; et al. Revised criteria for diagnosis of NIFTP reveals a better correlation with tumor biological behavior. ENDOCRINE CONNECTIONS, v. 8, n. 11, p. 1529-1538, NOV 2019. (17/06487-0, 14/06570-6, 16/25784-2, 17/16315-1)

DE JESUS PANIZA, ANA CAROLINA; MENDES, THAIS BIUDE; BORGES VIANNA, MATHEUS DUARTE; DIAS THOMAZ, DEBORA MOTA; CHIAPPINI, PAULA B. O.; COLAZZA-GAMA, GABRIEL A.; LINDSEY, SUSAN CHOW; DE CARVALHO, MARCOS BRASILINO; FERREIRA ALVES, VENANCIO AVANCINI; CURIONI, OTAVIO; et al. Revised criteria for diagnosis of NIFTP reveals a better correlation with tumor biological behavior. ENDOCRINE CONNECTIONS, v. 8, n. 11, p. 10-pg., 2019-11-01. (14/06570-6, 16/25784-2, 17/16315-1, 17/06487-0)