Geração e fenotipagem de camundongos transgênicos K5-Calicreína 5

• Processo: 17/24730-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 06 de abril de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de março de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética
• Pesquisador responsável: Katiuchia Uzzun Sales
• Beneficiário: Elaine Zayas Marcelino da Silva
• Supervisor: Thomas Bugge
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: National Institutes of Health, Bethesda (NIH), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 16/13228-8 - Estudo genético da superexpressão de LEKTI em modelo experimental de câncer de cabeça e pescoço, BP.PD
• Assunto(s): Neoplasias de cabeça e pescoço Calicreínas Inibidor de serinopeptidase do tipo Kazal 5 Transformação celular neoplásica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hnscc | kallikrein 5 | Klk5 | Lekti | Matriptase | Scc | Genética in vivo

Resumo

O carcinoma de cabeça e pescoço (HNSCC) é o sexto tipo de câncer mais comum no mundo. A matriptase é uma protease da família das serino proteases transmembranas do tipo II que induz a transformação maligna, quando expressa em células-tronco epiteliais. Sabe-se que processo se dá através da ativação proteolítica dos receptores pro-HGF e PAR-2 que, respectivamente, levam à ativação das vias de sinalização de PI3K-Akt-mTor e NFºB. Durante a diferenciação terminal dos queratinócitos na epiderme, foi demonstrado que a matriptase ativa proteoliticamente as pro-calicreínas 5 e 7, e estas, quando ativadas, são inibidas pelo inibidor de serino-proteases LEKTI (Lympho-Epithelial Kazal-Type-related Inhibitor). Resultados preliminares do nosso laboratório indicam que, em biópsias humanas de carcinomas orais, LEKTI está expresso predominantemente em células bem-diferenciadas do tumor. Assim, levantamos a hipótese de que a transformação maligna mediada pela matriptase é inibida por LEKTI em carcinomas. Para investigar essa hipótese, camundongos transgênicos que expressam matriptase sob o controle do promotor da queratina 5 (K5-Mat) foram cruzados com camundongos que expressam LEKTI sob o controle do mesmo promotor (K5-LEKTI) com o intuito de induzir a expressão simultânea dos dois transgenes em células tronco epiteliais. Nossos resultados (ainda não publicados) mostram que a expressão de LEKTI nos camundongos duplo-transgênicos leva a um resgate proeminente do fenótipo pré-maligno apresentado pelos camundongos K5-Mat. Sobretudo, a expressão de LEKTI retarda a formação e a progressão de tumores matriptase-dependentes em modelo de carcinogênese induzida por DMBA. Visto que LEKTI é incapaz de inibir a matriptase diretamente, LEKTI pode estar agindo através da inibição de calicreínas epiteliais. De fato, a análise da expressão de calicreína 5 (KLK5) por imunohistoquímica mostrou que este serino protease está aumentada nos camundongos K5-Mat e que a co-expressão de LEKTI nos camundongos duplo transgênicos foi capaz de reverter este fenótipo. Esses resultados indicam que KLK5 é um possível substrato para matriptase no carcinoma. Assim para investigar este novo mecanismo de inibição da carcinogênese por LEKTI in vivo objetivamos gerar e caracterizar um modelo de camundongo transgênico que expressa KLK5 nas células tronco epiteliais. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MARCELINO DA SILVA, ELAINE ZAYAS; DE CAMPOS FRAGA-SILVA, THAIS FERNANDA; YUAN, YAO; ALVES, MARCIA GAIAO; PUBLIO, GABRIEL AZEVEDO; DA FONSECA, CAROL KOBORI; KODAMA, MARCIO HIDEKI; VIEIRA, GABRIEL VILIOD; CANDIDO, MARINA FERREIRA; RAMOS INNOCENTINI, LARA MARIA ALENCAR; et al. Kallikrein 5 Inhibition by the Lympho-Epithelial Kazal-Type Related Inhibitor Hinders Matriptase-Dependent Carcinogenesis. CANCERS, v. 13, n. 17, SEP 2021. (17/24730-9, 16/13228-8, 14/06316-2)