Estudo genético da superexpressão de LEKTI em modelo experimental de câncer de cabeça e pescoço

Resumo

O câncer de cabeça e pescoço compreende predominantemente carcinomas de células escamosas e acomete a cavidade oral, laringe e faringe. O carcinoma de cabeça e pescoço (HNSCC) é o sexto tipo de câncer mais comum no mundo e acomete cerca de 550.000 pacientes ao ano. A matriptase, uma protease da família das serino proteases transmembranas do tipo II, induz a transformação maligna, quando expressa em células-tronco epiteliais. Foi demonstrado que a ativação proteolítica do pro-HGF e a consequente ativação da via de sinalização do PI3K-Akt-mTor constitui um dos mecanismos moleculares pelo qual a matriptase estimula a transformação maligna. Outro componente essencial para a atividade oncogênica da matriptase é a superexpressão de citocinas inflamatórias, modulada pela ativação do fator de transcrição NFºB, que decorre da ativação proteolítica do PAR-2 pela matriptase. Ainda, durante a diferenciação terminal dos queratinócitos da epiderme, foi demonstrado que a matriptase ativa proteoliticamente as pro-calicreínas 5 e 7, e estas, quando ativadas, são inibidas pelo inibidor de serino-proteases LEKTI. Resultados preliminares do nosso laboratório indicam que, em biópsias humanas de carcinomas orais, LEKTI está expresso predominantemente em células bem-diferenciadas do tumor. Além disso, outros resultados preliminares de nosso grupo sugerem que a expressão de LEKTI é induzida pela expressão de matriptase nas células-tronco epiteliais. Neste projeto, levantamos a hipótese de que matriptase e LEKTI fazem parte da mesma cascata proteolítica, em carcinomas. Para testar se LEKTI atua como inibidor da atividade carcinogênica exercida pela matriptase, camundongos transgênicos que expressam LEKTI sob o controle do promotor da queratina 5 (K5-LEKTI) estão em cruzamento com camundongos que expressam matriptase nas células tronco epiteliais (camundongos K5-Mat). Os resultados preliminares mostram-se muito promissores e indicam que, no camundongo K5-Mat/K5-LEKTI, o fenótipo pré-maligno característico dos camundongos K5-Mat é 100% resgatado. Visto que LEKTI é incapaz de inibir a matriptase diretamente, postulamos a existência de um terceiro alvo para a matriptase, além do pro-HGF e do PAR-2, na neoplasia maligna epitelial. Nesse contexto, será avaliado neste estudo se a inibição da via proteolítica da matriptase por LEKTI se dá através da atividade inibitória direta sobre as calicreínas epiteliais nos carcinomas. Serão empregadas manipulações genéticas in vivo, análises histológica e molecular de tecidos oriundos destes modelos experimentais, além de ensaios celulares in vitro; com o intuito de dissecar os mecanismos genéticos e celulares envolvidos na transformação maligna epitelial dependente de matriptase com ênfase no papel inibitório de LEKTI. Os resultados obtidos serão relacionados aos de outro projeto deste grupo de pesquisa, onde estão sendo avaliados a expressão de LEKTI e das calicreínas epiteliais em biópsias de carcinomas orais humanos.