O papel funcional da proteína adaptadora RACK1 na ativação de mastócitos

Resumo

Os mastócitos são células efetoras multifuncionais do sistema imunológico que participam das imunidades inata e adquirida. Os mastócitos atuam em diferentes eventos biológicos tais como: defesa do organismo, angiogênese, reações alérgicas e inflamatórias. Estes processos estão diretamente relacionados à ativação dos mastócitos e, subsequente, com a liberação de mediadores químicos. O mecanismo de ativação mais conhecido ocorre pela interação de um antígeno multivalente com a imunoglobulina E (IgE), que está ligada ao receptor de alta afinidade para a IgE (FceRI), o que resulta no intercruzamento dos receptores e na ativação da via de transdução de sinal. Embora existam muitos estudos relacionados com os mecanismos moleculares da ativação dos mastócitos, algumas das proteínas reguladoras da via de transdução de sinal ainda permanecem desconhecidas. A RACK1 (receptor for activated C kinase 1) é uma proteína adaptadora intracelular altamente conservada que se associa à proteínas de sinalização (quinase e fosfatases), fatores de transcrição e domínios citoplasmáticos de proteínas transmembrana. A RACK1 pode regular vias distintas de sinalização e participar ativamente na transdução do sinal. Estudos recentes demonstram que a RACK1 participa na ativação de algumas células imunes e na regulação de respostas inflamatórias. A análise de genes relacionados com a asma identificou o gene GNB2L1, codificador da proteína RACK1, como um possível gene relacionado com a sinalização celular na asma. A RACK1 está associada à várias proteínas de sinalização que também estão presentes na via de ativação dos mastócitos. A asma aguda é uma das reações atópicas e anafiláticas desencadeadas pela ativação dos mastócitos. Dados recentes obtidos em nosso laboratório identificaram, pela primeira vez, a RACK1 em mastócitos da linhagem RBL-2H3. A RACK1 está presente nos lipid rafts e aumentada quando os gangliosídeos derivados do GD1b foram removidos desses microdomínios. Ainda, os nossos resultados preliminares demostram em mastócitos estimulados via FcµRI que a maioria da RACK1 é translocada para o núcleo. Embora parte dela permanece em regiões adjacentes a membrana plasmática. Estes achados sugerem que RACK1 possa estar envolvida na organização e funcionamento dos complexos de sinalização nos lipid rafts, bem como, nas vias de transdução de sinal que regulam a liberação de mediadores inflamatórios em mastócitos. Portanto, o presente estudo tem como objetivo caracterizar o papel funcional da RACK1 na ativação e migração de mastócitos, processos requeridos durante a alergia e inflamação. O papel da RACK1 em mastócitos será investigado através do uso RNA de interferência em mastócitos da linhagem RBL-2H3. O papel de RACK1 na anafilaxia também será investigado utilizando camundongos injetados com RNA de interferência. O conhecimento sobre o papel de RACK1 na ativação dos mastócitos pode levar à novos alvos terapêuticos envolvidos nos processos alérgicos e inflamatórios.