Aumento da imunogenicidade de células de câncer colorretal tratadas com 5-fluorouracil, pelo bloqueio da autofagia com hidroxicloroquina

• Processo: 17/25660-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Graziela Gorete Romagnoli
• Beneficiário: Carla Sanzochi Fogolin
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias colorretais Autofagia Quimiorresistência Hidroxicloroquina Células dendríticas Imunogenicidade Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Autofagia | câncer colorretal | células dendríticas | imunologia de tumores | Quimiomodulação | Imunologia de tumores

Resumo

O câncer colorretal (CRC) é o terceiro tipo de câncer mais comum no Brasil e no mundo, sendo observados muitos casos de metástases e recidivas, decorrente do desenvolvimento de resistência aos quimioterápicos, administrados em doses máximas toleráveis (DMT). Um dos mecanismos relacionados à quimiorresistência é a autofagia, processo de auto-degradação, que culmina na reciclagem de organelas danificadas e proteínas de longa vida, contribuindo assim para a homeostase das células. A autofagia age como uma barreira contra a transformação maligna em seu estágio inicial, porém em tumores pré-estabelecidos é subvertida a fim de que a célula se adapte ao estresse intracelular e ambiental. Uma vez que a autofagia propicia o escape tumoral, seu bloqueio farmacológico com a hidroxicloroquina (HCQ) tem sido apontado como uma alternativa para potencializar a efetividade dos quimioterápicos. A HCQ inibe a fusão do autofagossomo ao lisossomo, impedindo assim a formação do autofagolisossomo e, por conseguinte, a via degradativa. Visto que baixas concentrações de quimioterápicos como o paclitaxel e o 5-fluorouracil (5-FU) aumentam a imunogenicidade das células tumorais, hipotetizamos que a combinação de HCQ com 5-FU levaria ao bloqueio da autofagia, minimizando a degradação dos antígenos tumorais no citosol e aumentando sua disponibilidade para apresentação ao sistema imune, com reflexo na expressão de sinais de ativação na membrana. Para testar essa hipótese, células dendríticas (DCs) humanas serão diferenciadas in vitro e sensibilizadas com lisado de células de câncer colorretal humano, HCT-116, previamente expostas à combinação de HCQ e 5-FU. Após tratamento, as células serão avaliadas por citometria de fluxo quanto à expressão de moléculas envolvidas na ativação/supressão linfocitária.