Terapia gênica in vivo em modelo murino de lesão, a partir de um vetor lentiviral carreando o receptor solúvel de TGF²-1, visando a redução da fibrose do músculo esquelético durante o reparo muscular.

• Processo: 22/07471-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Roberta Sessa Stilhano Yamaguchi
• Beneficiário: Luana de Mambro
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo (FCMSCSP). Fundação Arnaldo Vieira de Carvalho. São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/17660-5 - Terapia Cell-free: entrega de vesículas extracelulares derivadas de células-tronco mesenquimais (MSCs-EVs) encapsuladas com biomaterial para melhorar o reparo do músculo esquelético e reduzir a fibrose., BE.EP.MS
• Assunto(s): Fibrose Lentivirus Lesão muscular Terapia genética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fibrose | lentivirus | lesão muscular | terapia genica | Terapia gênica

Resumo

As lesões musculares podem ser causadas por lacerações, estiramentos ou contusões, sendo esses dois últimos, os responsáveis por mais de 90% de todos os traumas causadas em esportes. No caso das lesões mais extensas, nas quais ocorre perda muscular volumétrica (LMCV), o mecanismo de reparo fisiológico é sobrecarregado, favorecendo o reparo tecidual disfuncional, com a formação de tecido fibrótico exacerbado, principalmente pela liberação de TGF²1. Isso ocorre, pois, essa citocina se liga ao receptor do tipo II (T²RII) na membrana do sarcolema e ativa vias de sinalização que acarretam a diminuição da expressão de genes mitóticos e o aumento da expressão de genes fibróticos e atróficos. Com isso, tem sido de grande valia a procura por tratamentos que busquem reverter a exacerbação desse mecanismo fibrótico de forma categórica, sendo a Terapia Gênica (TG) uma das técnicas mais estudadas, atualmente. Assim, o trabalho apresenta um sistema baseado em TG, no qual o vetor lentiviral Lv-pNF-kB-sT²RII será construído, objetivando a redução da fibrose em modelo murino de lesão muscular por contusão, pela inibição do TGF²-1 a partir do promotor induzível NF-kB. O projeto será dividido em duas grandes vertentes, sendo a primeira caracterizada pela avaliação da funcionalidade in vitro do vetor, incluindo a construção dos lentivetores e análise da atividade deles em células C2CC12 a partir da expressão de NF-kB, induzida por cardiotoxina, e a segunda vertente será a realização da terapia genica in vivo, a partir de modelos murinos de lesão, que receberão o vetor e serão avaliados por teste de Rota-Rod, histologia e imuno-histoquímica. Os dados obtidos serão reunidos para análise estatística no programa GraphPad Prism 8. Dessa forma, espera-se com esses resultados, obter redução da fibrose muscular, aumento da regeneração tecidual e recuperação funcional do músculo esquelético.