Manipulação da expressão de uma isoforma secretada de Neurexina-3 em neurônios derivados de pacientes com uma síndrome do espectro autista

• Processo: 25/22941-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2026
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Fabio Papes
• Beneficiário: Lilian Lee Depieri
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/12762-1 - Estudo de alterações na migração neuronal em um transtorno do espectro autista utilizando modelos celulares humanos e modelos animais, AP.TEM
• Assunto(s): Transtorno autístico Neurodesenvolvimento Inativação gênica Sinapses Splicing
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: autismo | Doenças Genéticas Raras | neurodesenvolvimento | silenciamento genico | sinápse | splicing | Neurobiologia celular e molecular

Resumo

A Síndrome de Pitt-Hopkins (PTHS), foco deste projeto, é uma neuropatologia monogênica pertencente aos transtornos do espectro autista (TEA) e é causada pela haploinsuficiência do gene TCF4. Além da expressão alterada desse gene, resultados preliminares do nosso grupo identificaram desregulações na expressão de RBFOX1 e NOVA1, que codificam proteínas reguladoras de splicing de RNA. A partir de dados de RNA-seq obtidos de culturas neuronais derivadas de pacientes com PTHS e indivíduos controle, realizamos análises bioinformáticas para investigar eventos de splicing aberrante associados a genes do neurodesenvolvimento. Tais análises identificaram um evento de exon skipping associado ao gene NRXN3, que resulta na formação de uma forma solúvel da proteína neurexina-3, distinta da isoforma proteica transmembrana codificada pelo transcrito canônico deste gene. Além disso, nossas análises apontaram que a isoforma solúvel ocorre predominantemente em células de genótipo controle, em comparação com células de pacientes. O presente projeto tem como objetivo compreender a função desta neurexina-3 solúvel no contexto deste tipo de autismo monogênico, particularmente com relação ao seu possível envolvimento na organização sináptica. Para tanto, será realizado o silenciamento da expressão do transcrito que codifica a isoforma solúvel em células neuronais de genótipo controle, seguido da avaliação molecular e fisiológica das sinapses. De modo complementar, culturas neuronais PTHS serão tratadas com a isoforma solúvel de neurexina-3, com o objetivo de avaliar se este tratamento restaura a atividade sináptica no tecido neural doente. (AU)