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Superexpressão e silenciamento dos genes AHSP e Sara1 em células eritroides, análise por SAGE da expressão gênica em cultura eritroide estimulada por eritropoetina, identificação de genes em pacientes talassêmicos homozigotos para a mutação beta 39 (C-T) com evoluções clínicas distintas através de biblioteca subtrativa e estudo in vivo da mutação -195 do promotor de gama globina

Processo: 05/51222-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2006
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2008
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Fernando Ferreira Costa
Beneficiário:Anderson Ferreira da Cunha
Instituição-sede: Centro de Hematologia e Hemoterapia (HEMOCENTRO). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:02/13801-7 - Alterações hereditárias das hemoglobinas: genética molecular, aspectos da evolução clínica e produção de animais transgênicos, AP.TEM
Assunto(s):Doenças hematológicas   Talassemia beta   Globinas

Resumo

A elucidação dos mecanismos moleculares envolvidos nas fisiopatologias e tratamento de doenças hematológicas tem sido objeto de numerosas investigações. Os genes AHSP e Sarai a foram identificados utilizando a técnica de biblioteca subtrativa em células eritróides. Uma outra técnica que vêm sendo amplamente utilizada para o entendimento do perfil de expressão gênica em diversas células e tecidos é o SAGE. Com esta técnica é possível quantificar a expressão dos genes de um determinado tipo celular possibilitando inclusive a descoberta de novos genes. Devido ao conhecimento incompleto da regulação gênica em células da linhagem eritróide, propomos neste trabalho traçar o perfil de expressão gênica por SAGE em cultura eritróide de duas fases para identificação de genes estimulados pela adição de eritropoetina. Um outro propósito é a construção de biblioteca subtrativa para avaliação de genes relacionados a melhor evolução clínica em dois pacientes beta talassêmicos homozigotos para a mutação beta 39. (C-T) com evoluções clínicas distintas (maior e intermediária). Propomos também um aprofundamento no estudo dos genes Sara1a e AHSP através do silenciamento por RNA de interferência e superexpressão em cultura de células eritróides de duas fases além do estudo "in vivo" dos efeitos causados pela mutação - 195 do promotor da gama globina na expressão dos genes formadores da hemoglobina humana. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DA CUNHA, A. F.; BRUGNEROTTO, A. F.; DUARTE, A. S.; LANARO, C.; COSTA, G. G. L.; SAAD, S. T. O.; COSTA, F. F. Global gene expression reveals a set of new genes involved in the modification of cells during erythroid differentiation. Cell Proliferation, v. 43, n. 3, p. 297-309, JUN 2010. Citações Web of Science: 6.
DA CUNHA, ANDERSON F.; BRUGNEROTTO, ANA F.; FINZI CORAT, MARCUS A.; DEVLIN, EMILY E.; GIMENES, ANA P.; DE MELO, MONICA BARBOSA; CORREA PASSOS, LUIZ A.; BODINE, DAVID; SAAD, SARA T. O.; COSTA, FERNANDO F. HIGH LEVELS OF HUMAN gamma-GLOBIN ARE EXPRESSED IN ADULT MICE CARRYING A TRANSGENE OF THE BRAZILIAN TYPE OF HEREDITARY PERSISTENCE OF FETAL HEMOGLOBIN ((A)gamma-195). HEMOGLOBIN, v. 33, n. 6, p. 439-447, 2009. Citações Web of Science: 2.

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