Estudo do perfil de expressao genica de celulas da medula ossea humana diferenciada em osteoblastos.

• Processo: 07/58015-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Karina Fittipaldi Bombonato Prado
• Beneficiário: Glauce Crivelaro Do Nascimento
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Células-tronco Terapia baseada em transplante de células e tecidos Diferenciação celular Osteoblastos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cdna Microarrays | Celulas-Tronco | Diferenciacao Celular | Medula Ossea Humana | Osteoblastos | Terapia Celular

Resumo

As células tronco adultas são uma poderosa base celular para o tratamento de um espectro de doenças não tratadas por métodos tradicionais. A compreensão da natureza e qualidade de células-tronco específicas de cada tecido permitirá sua futura utilização na terapia celular. O objetivo deste trabalho é fazer uma análise da expressão gênica em larga escala (transcriptoma) de células-tronco da medula óssea humana (MO) e do potencial osteogênico durante a diferenciação em osteoblastos. Células-tronco adultas serão isoladas da MO, cultivadas em meio essencial mínimo (MEM 20%) até a subconfluência, plaqueadas na concentração de 2 x 104 células/poço (n-5) e divididas em dois grupos: controle (células em MEM 20%) e tratadas com meio total suplementado para diferenciação osteoblástica (MTS 10%). Após 7,14 e 21 dias de cultura, serão avaliadas viabilidade e proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP) e formação de nódulos mineralizados. Para análise da expressão gênica, o RNA total das células serão extraídas das células controle e diferenciadas. Serão feitas marcações das sondas de cDNA (amostras) com fluorocromos Cy3 e Cy5 e hibridização com microarrays contendo 4.500 seqüências representando a maioria dos tecidos humanos. A mudança significante de expressão gênica será analisada pelo programa SAM (Significance Analysis of Microarrays) - (p<0.05). (AU)